24小时热门版块排行榜    

查看: 7935  |  回复: 12

zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子

引用回帖:
7楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-31 16:22:47
1、        细胞密度转染时不要太多,如果转入的基因明显抑制增殖还好,如果影响不大的话70%就可以(还要看细胞的增长速度),毕竟你转染后细胞还是要增殖的,过了对数生长期,细胞表达能力就下降了
2、        实验载体与海肾荧 ...

1:感觉细胞密度大一点会抵抗转染试剂的毒性,铺板密度跟细胞状态相关,我铺24孔 密度是5*10 ^ 4 个。还是依据细胞状态与实验目的而定;
2:有pGL-4了  一个整合载体,挺好用;
4:我24孔 加2ul Lipo 2000  ,细胞死光光了都....miRNA 30pmol
5:很有道理!
6:很有道理!
麻辣王子不爱做实验
11楼2017-11-29 17:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子

之前印象中有人问载体共享的,小木虫的消息提醒功能不太完善;现在又找不到了。不过我们这里的载体是pGL3的 ;新款载体为pGL4 ; 可以求助pGL4的~~祝好!
麻辣王子不爱做实验
12楼2017-11-29 17:28:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zly19912002

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by zht930528 at 2017-11-29 17:19:57
谢谢回复!其中第三条:有做miRNA的话 mimics 与质粒得共转染啦;第五:如果铺板用了双抗,转染前用无抗无血清培养基或PBS洗一下,转染效率其实还可以~ 另外:Lipo 2000 如果储存不当,一定就不要用了...会把细胞都 ...

楼主您好,我最近在做这个实验,最后上机时老是没信号,不知道您遇到过这种情况吗?
随遇而安
13楼2017-12-20 19:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zht930528 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +3 gdlf9999 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:08 by 搏击518
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
信息提示
请填处理意见