应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌只长菌体，不产蛋白该怎么办
81/1返回列表
查看: 1910  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

大神救救我

铁虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌只长菌体，不产蛋白该怎么办 已有3人参与

向各位大神请教一个问题：我从小摇瓶中将大肠杆菌接到四个2L的大摇瓶中，在OD1.0左右，加入IPTG诱导，诱导量为千分之二。10小时后收菌，一瓶的OD为1.8，其余3瓶的OD都在7左右。但是我上蛋白纯化仪收蛋白时只有那瓶OD为1.8的菌有我们要的蛋白。
现在分析可能是其余的菌将培养基消耗产菌体去了。我想问你一下能不能控制什么实验条件，使得大肠产蛋白呀！

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-08-30 11:20:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
培养基是什么？诱导时间提前些看看，比如OD=0.5时。
赞一下 回复此楼
2楼2017-08-30 14:50:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cod19852008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加抗生素了不？质粒丢失吧，丢失质粒的就长的快，不受诱导影响
赞一下 回复此楼
3楼2017-08-30 16:22:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

少女天空

新虫 (初入文坛)
改变诱导条件

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
4楼2017-08-30 17:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换条件吧，比如诱导温度什么之类的，多试几个条件

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2017-08-30 20:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

换条件吧，比如诱导温度什么之类的，多试几个条件

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-08-30 20:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大神救救我

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xuweitao at 2017-08-30 14:50:33
培养基是什么？诱导时间提前些看看，比如OD=0.5时。

培养基就是普通的LB培养基，昨天一瓶OD0.4时诱导，一瓶在1.1诱导。今天收菌时OD都在10左右。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-08-31 09:25:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大神救救我

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cod19852008 at 2017-08-30 16:22:49
加抗生素了不？质粒丢失吧，丢失质粒的就长的快，不受诱导影响

抗生素加了。如果质粒丢失了不应该只有一瓶产蛋白，另外三瓶不产，毕竟都是从一个小摇瓶接的。不过我们打算重新提质粒了，进行转化了。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-08-31 09:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大神救救我 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求材料，环境专业调剂 +3 18567500178 2026-03-18 3/150 2026-03-23 23:50 by 热情沙漠
[考研] 081700 调剂 267分 +7 迷人的哈哈 2026-03-23 7/350 2026-03-23 23:19 by 星空星月
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 材料与化工考研调剂 +4 孅華 2026-03-22 4/200 2026-03-23 16:13 by 一休哥FU
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭