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crispr cas9实验过程中遇到污染不知如何解决
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求助 在构建cas9敲减质粒过程中遇到了目的片段污染问题 我是找公司合成需要的上下游目的片段 到手后用DEPC水溶解 然后上游引物连接 酶切载体 跑琼脂糖胶 切胶回收 T4连接酶连接 最后转化挑单克隆送测序 问题来了 测序的结果反馈 连入的并不是我合成的引物而是另一段片段大概40bp左右 我设计的引物是人13号染色体上的20+bp 而测序出来的是15号染色体上的40+bp 求助各位大神 我的操作是不是哪里有问题 发自小木虫IOS客户端 |
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