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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » SDS-PAGE求助，分离胶两边不一样高，浓缩胶跑出来，到了电泳缓冲液里
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玉兔Jane

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE求助，分离胶两边不一样高，浓缩胶跑出来，到了电泳缓冲液里 已有2人参与

六一的电泳槽，琼脂封底，分离胶，浓缩胶，上样，电泳。
浓缩胶电压70V，1 h左右到达分界面，调电压，分离胶电压110V，2 h左右，跑完。
最近出现的情况，浓缩胶的时候也能跑成一条直线，后面分离胶底部与琼脂糖分离向上跑，浓缩胶也向上跑，梳子齿跑到电泳缓冲液里了。
染色效果，蛋白条带是有的，但是不同大小分子量之间距离比较近，而且条带很浅，Marker的条带也很浅。
4个电泳槽，3个是这种情况，1个是正常的。分离胶和浓缩胶，4个电泳槽一起配的溶液，一起倒的。
电泳缓冲液是新配的，正负极没有插反。
求助：原因？
谢谢啦

SDS-PAGE求助，分离胶两边不一样高，浓缩胶跑出来，到了电泳缓冲液里
TIM图片20170827210548.jpg


SDS-PAGE求助，分离胶两边不一样高，浓缩胶跑出来，到了电泳缓冲液里-1
TIM图片20170827210553.jpg


SDS-PAGE求助，分离胶两边不一样高，浓缩胶跑出来，到了电泳缓冲液里-2
TIM图片20170827210557.jpg
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1楼 2017-08-27 21:21:57
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是制胶的时候没放平吧

发自小木虫IOS客户端
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2楼2017-08-27 21:48:45
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杨默格

禁虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-02 22:33:49
本帖内容被屏蔽
3楼2017-08-28 09:27:45
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寥落星晨

木虫 (小有名气)
都看到内测玻璃板上部边缘了，明显电泳液没加够

发自小木虫IOS客户端
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4楼2017-08-29 19:34:58
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玉兔Jane

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 水逝雁南飞 at 2017-08-27 21:48:45
可能是制胶的时候没放平吧

谢谢，制胶的时候放平了，胶是平的。
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5楼2017-09-02 09:26:47
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玉兔Jane

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 杨默格 at 2017-08-28 09:27:45
可能原因是内槽没密封好，在跑的过程中电泳夜从地下漏出来，再加之上面泡沫太多，上面液面不平，才会跑出是斜的。

后来观察了下，也有继续做实验，确实是您说的这个情况，谢谢。
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6楼2017-09-02 09:27:46
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玉兔Jane

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 寥落星晨 at 2017-08-29 19:34:58
都看到内测玻璃板上部边缘了，明显电泳液没加够

谢谢，刚开始电泳时，缓冲液是满的，可能后来漏了一些。
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7楼2017-09-02 09:29:30
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逍遥者LLEC


发自小木虫Android客户端
8楼2018-09-07 21:52:42
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gfc7758

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2018-09-08 11:32:49
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