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cxbaoa

金虫 (正式写手)

[交流] 菜鸟求助液相色谱测定药物浓度的方法问题,谢谢大家

以前没接触过高效液相色谱,前不久做试验(抗癌药物异环磷酰胺在无机吸附剂上的吸附)需要测药物随时间在溶液中浓度变化,以前课题组都用紫外,做出标准曲线即可,但是我的药物存在紫外末端吸收,因此数据老是不对头忽大忽小,因此考虑用高效液相色谱测浓度。也有此药的文献但都是医学方面测其在血清中浓度,但我的实验目的很简单,就是测这个药(原料药)在水溶液中的浓度(没有其他的东西),那么我该怎么做呢?(那也不存在对照品供试品等称呼了吧)我自己想的是,可不可以将系列浓度溶液进样先做出浓度-面积工作曲线,然后将需要测的样进样之后,根据峰面积带入标准曲线求即可?如果浓度比标准曲线大很多那么稀释后进样即可?另外使用进样针每次进样量精确吗?(峰面积和浓度相关还是和质量相关啊?)
去别人那里做试验,从来没做过,提心吊胆的。
希望得到大家的帮助!
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淡淡欢喜淡淡愁
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jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cxbaoa(金币+15,VIP+0):谢谢版主啊,实验做起来之后再有问题的话在短消息问你行吗 2-11 23:08
你的问题我想最大的难度在于你上HPLC后是不是能出来一个峰,或说你的峰形是不是很好,这个问题要解决了,别的都不是问题啦。这样就成了一个简单的外标了,只要把你的样品的峰高和你的标样的峰高调的差不多高就好了,如果你要求你的准确度很高的话,那就要做标准曲线啦,只要保证你的样品的峰高(面积)在你的曲线范围之内就行了,如果不行就要把样品稀一下的。外标进样量当然要精确了,峰面积和浓度相关的。(其实浓度和质量是相关的)
2楼2009-02-11 13:00:07
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jiamingw

金虫 (小有名气)

★ ★
cxbaoa(金币+2,VIP+0):谢谢了啊 2-11 23:08
版主说得很详细了,就是用外标法,要做标准曲线的。
如果没有自动进样,准确度会差一些。
3楼2009-02-11 15:40:25
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swt1898

铁虫 (著名写手)

楼上的很有才啊
4楼2009-02-14 22:16:59
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