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cxbaoa

金虫 (正式写手)

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[交流] 菜鸟求助液相色谱测定药物浓度的方法问题，谢谢大家

以前没接触过高效液相色谱，前不久做试验（抗癌药物异环磷酰胺在无机吸附剂上的吸附）需要测药物随时间在溶液中浓度变化，以前课题组都用紫外，做出标准曲线即可，但是我的药物存在紫外末端吸收，因此数据老是不对头忽大忽小，因此考虑用高效液相色谱测浓度。也有此药的文献但都是医学方面测其在血清中浓度，但我的实验目的很简单，就是测这个药（原料药）在水溶液中的浓度（没有其他的东西），那么我该怎么做呢？（那也不存在对照品供试品等称呼了吧）我自己想的是，可不可以将系列浓度溶液进样先做出浓度-面积工作曲线，然后将需要测的样进样之后，根据峰面积带入标准曲线求即可？如果浓度比标准曲线大很多那么稀释后进样即可？另外使用进样针每次进样量精确吗?(峰面积和浓度相关还是和质量相关啊？)
去别人那里做试验，从来没做过，提心吊胆的。
希望得到大家的帮助！

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淡淡欢喜淡淡愁

1楼 2009-02-11 11:54:09

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jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab

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cxbaoa(金币+15,VIP+0):谢谢版主啊，实验做起来之后再有问题的话在短消息问你行吗 2-11 23:08

你的问题我想最大的难度在于你上HPLC后是不是能出来一个峰，或说你的峰形是不是很好，这个问题要解决了，别的都不是问题啦。这样就成了一个简单的外标了，只要把你的样品的峰高和你的标样的峰高调的差不多高就好了，如果你要求你的准确度很高的话，那就要做标准曲线啦，只要保证你的样品的峰高（面积）在你的曲线范围之内就行了，如果不行就要把样品稀一下的。外标进样量当然要精确了，峰面积和浓度相关的。（其实浓度和质量是相关的）