24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 716  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

百态人生

银虫 (小有名气)

[求助] 求助关于ORF的问题 已有1人参与

大家好,最近实验遇到点小问题:我要重组表达一个蛋白,这个蛋白是由两个亚基构成的,但是编码亚基蛋白的ORF1和ORF2有几个碱基重叠了,我重组的时候需不需要分别PCR?但他们各自都有起始密码子,重组后宿主菌会不会自动识别啊?求助,先谢谢大家了。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bujunyang

木虫 (正式写手)

卓尔不群

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
百态人生: 金币+5, ★★★很有帮助 2017-09-06 14:25:45
重组表达一个蛋白?是要把两个亚基做融合表达吗?
你做的是病毒?无论原核还是真核,两个ORF是不会重叠的。
如果要把病毒的两个蛋白在细菌中表达为融合蛋白的话,你要分别把两个ORF克隆出来,然后连到一块。第一个ORF一定要保留起始密码子,删除终止密码子,第二个ORF保留终止密码子,起始密码子保不保留无关紧要,关键是不要移码。
来是偶然,去是必然。
3楼2017-08-25 13:10:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫

我觉得应该没有影响的吧,因为你真正有用的是编码蛋白的序列,就像信号肽一样,这是我个人观点,但没做过蛋白表达。

发自小木虫IOS客户端
学习,交流
2楼2017-08-22 23:51:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 080200专业277分,求带走! +3 瓶子PZ 2026-03-31 3/150 2026-03-31 18:19 by 夜空空哦
[考研] 317求调剂 +12 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 13/650 2026-03-31 16:44 by asdfzly
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +4 lmnlzy 2026-03-31 4/200 2026-03-31 15:25 by 西京学院招办
[考研] 一志愿085600中科院宁波所276分求调剂 +12 材料学257求调剂 2026-03-28 13/650 2026-03-31 14:30 by 六翼TMR
[考博] 材料专业申博 +5 杜雨婷dyt 2026-03-29 5/250 2026-03-31 11:19 by oooqiao
[考研] 070300化学279求调剂 +7 哈哈哈^_^ 2026-03-31 9/450 2026-03-31 10:02 by cal0306
[考研] 085601一志愿中山大学深圳材料工程330求调剂 +5 pipiver 2026-03-30 5/250 2026-03-31 07:37 by JourneyLucky
[考研] 370求调剂 +3 080700调剂 2026-03-30 3/150 2026-03-31 01:09 by A_Zhe
[考研] 317求调剂 +8 十闲wx 2026-03-24 8/400 2026-03-30 21:00 by peike
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +11 麻辣鱿鱼 2026-03-27 12/600 2026-03-30 19:33 by Wang200018
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +7 Zuhui0306 2026-03-25 7/350 2026-03-30 19:01 by 源_2020
[考研] 0703化学求调剂 +6 丹青奶盖 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:33 by 探123
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 复试调剂 +3 raojunqi0129 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:27 by 落睿可思
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
信息提示
请填处理意见