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yfh20046

金虫 (正式写手)

[求助] WB非特异性条带太多 如何去除 已有3人参与

乳酸菌蛋白表达,反复冻融提取的膜蛋白,但wb中非特异性条带很多,请教各位大侠 ,去除非特异性条带的方法。

WB非特异性条带太多 如何去除
IMG_20170817_134521.jpg
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xiangcx

新虫 (小有名气)

会不会是冻融得到的膜蛋白大小不均一,所以会有这么多有反应的条带,可以试一下超声破碎么?
生活不止苟且和金钱,还有自然和远方。
15楼2017-08-26 15:57:06
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普通回帖

jipu

铁杆木虫 (知名作家)

所有的东西重配,现配现用,或者……p掉,2333

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-08-21 17:18:30
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yfh20046

金虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by jipu at 2017-08-21 17:18:30
所有的东西重配,现配现用,或者……p掉,2333

做过乳酸菌目的蛋白表达吗
3楼2017-08-21 17:26:05
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yfh20046

金虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by jipu at 2017-08-21 17:18:30
所有的东西重配,现配现用,或者……p掉,2333

做过乳酸菌目的蛋白表达吗
4楼2017-08-21 17:26:05
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jipu

铁杆木虫 (知名作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yfh20046 at 2017-08-21 17:26:05
做过乳酸菌目的蛋白表达吗...

木有,你再问问看吧……

发自小木虫Android客户端
5楼2017-08-21 17:28:03
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yfh20046

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jipu at 2017-08-21 17:28:03
木有,你再问问看吧……
...

好吧
6楼2017-08-21 17:28:55
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Suph

银虫 (正式写手)

7楼2017-08-21 18:20:17
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海底刚琴

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yfh20046: 金币+2, 有帮助 2017-08-23 15:28:38
最底下的条带已经有中空,说明你的蛋白浓度很大,或上样量很大,或者曝光时间太长。如果是细菌诱导表达蛋白,建议上样之前,将蛋白样品测一下浓度,或者直接经验稀释30~60倍。
生活总是有那么多门槛,一口气跨过去就好了。
8楼2017-08-22 06:50:59
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chaosyw

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yfh20046: 金币+1, 有帮助 2017-08-23 15:28:51
抗体特异性有问题的话只能换抗体的,建议买抗体前先上www.labome.com查下拟买抗体在sci中的报道情况,用别人用过的抗体做同样实验比较保险
9楼2017-08-22 07:21:46
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yfh20046: 金币+2 2017-08-23 15:30:00
从图片目测你没有目的条带,所有带都是非特异的
10楼2017-08-22 07:39:31
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