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金虫 (著名写手)

[交流] 如何调actin使均等

做RT-PCR，用actin做内参时候，亮度不一样，如何调整可以使条带一样亮呢？
调整点样量可以么？就是说，比如其中一条actin 非常亮，是其他条带的2倍，第二次电泳，把actin和目的基因点样量同时降低浓度么？这样actin 亮度一样了，可以反映同等条件下的目的条带强若么？

★穷则独善其身,达则兼济天下★

1楼 2009-02-09 21:20:13

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新虫 (小有名气)

★ ★ ★
dcb005(金币+3,VIP+0):谢谢 2-16 21:47

原因1，你在提取RNA时，normalization没有做好。那就要从新做归一化。
2，楼主，调整点样量是不可取的。你在做RT PCR时，要非常的小心，所有的component都要点到管子的底部，尤其是上样量。排除操作问题后，看看是不是还不行。
建议你从头做一遍。

2楼2009-02-11 12:42:06

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银虫 (正式写手)

不懂

3楼2009-02-11 22:49:08

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