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dcb005

金虫 (著名写手)

[交流] 如何调actin使均等

做RT-PCR,用actin做内参时候,亮度不一样,如何调整可以使条带一样亮呢?
调整点样量可以么?就是说,比如其中一条actin 非常亮,是其他条带的2倍,第二次电泳,把actin和目的基因点样量同时降低浓度么?这样actin 亮度一样了,可以反映同等条件下的目的条带强若么?

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★穷则独善其身,达则兼济天下★
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echocean

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
dcb005(金币+3,VIP+0):谢谢 2-16 21:47
原因1,你在提取RNA时,normalization没有做好。那就要从新做归一化。
       2,楼主,调整点样量是不可取的。你在做RT PCR时,要非常的小心,所有的component都要点到管子的底部,尤其是上样量。排除操作问题后,看看是不是还不行。
建议你从头做一遍。
2楼2009-02-11 12:42:06
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pengmanjun

银虫 (正式写手)

3楼2009-02-11 22:49:08
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