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田小荣儿

新虫 (小有名气)

[求助] MTT实验已有3人参与

第一次做MTT实验,设置了六个药物浓度,结果前三个药物浓度低一些的细胞活率接近一,后三个药物浓度高一些的大于一,都快达到对照组的二倍了,求助大神帮忙分析一下原因,小女子不胜感激

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李妞妞呀

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by simple__plan at 2017-08-21 15:11:25
种植的细胞数太大了,吸光度太大了,不能说明问题了?吸光度在 0-0.7之间满足线性关系。另外,药物促进细胞增值?

您好,我最近在做MTT实验,想请教您几个问题,如能回答,不胜感激。1.做MTT实验是不是应该设置空白组?抑制率=【(对照组-空白组)-(实验组-空白组)】/(对照组-空白组)?
2.您说的吸光度0-0.7是对照组的吸光度吧?我之前做的基本上对照组吸光度都大于0.7,这样的结果可信度是不是有点低?
3.我做的悬浮细胞,做MTT实验时,细胞和药物同时混合在一起,放入培养箱中培养,没有贴壁细胞的先加细胞,培养24h后再加药物这一步骤,我是按照文献里的这样操作,但是有人说,得先让细胞适应一段时间再加药,您怎么看?
4.96孔板离心去除上清(前期加的细胞培养基和药物以及MTT) 再加SDS溶解甲赞结晶,可不可以不离心去上清  直接加SDS呢(去上清的时候怕把细胞也吸走)?
5.我看有的视频加了MTT之后往培养箱里放96孔板的时候  用锡箔纸包着,这样有没有必要,或者说这样会不会影响细胞呼吸?
7楼2019-09-19 11:06:59
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yyffsjx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
药物有助于细胞增殖呗
2楼2017-08-19 17:55:54
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simple__plan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
种植的细胞数太大了,吸光度太大了,不能说明问题了?吸光度在 0-0.7之间满足线性关系。另外,药物促进细胞增值?
3楼2017-08-21 15:11:25
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ywwabc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、确定药物作用是增殖还是毒性
2、药物作用及作用时间时间调整细胞密度,一般每孔1000-10000个不等
3、细胞没长满,值又大于1的情况下可以等倍稀释检测,然后数据再X倍数算回来就可以了
4、如果是毒性实验,细胞确增殖,那就要重新调整浓度,不同实验室的相同细胞耐药性是不一样的
5、确定自己配药过程没有出错,加药浓度没有问题

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4楼2017-08-21 16:34:01
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