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汕头大学海洋科学接受调剂
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田小荣儿

新虫 (小有名气)

[求助] MTT实验 已有3人参与

第一次做MTT实验，设置了六个药物浓度，结果前三个药物浓度低一些的细胞活率接近一，后三个药物浓度高一些的大于一，都快达到对照组的二倍了，求助大神帮忙分析一下原因，小女子不胜感激

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1楼 2017-08-19 07:18:14
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yyffsjx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
药物有助于细胞增殖呗
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2楼2017-08-19 17:55:54
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simple__plan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
种植的细胞数太大了，吸光度太大了，不能说明问题了？吸光度在 0-0.7之间满足线性关系。另外，药物促进细胞增值？
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3楼2017-08-21 15:11:25
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ywwabc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、确定药物作用是增殖还是毒性
2、药物作用及作用时间时间调整细胞密度，一般每孔1000-10000个不等
3、细胞没长满，值又大于1的情况下可以等倍稀释检测，然后数据再X倍数算回来就可以了
4、如果是毒性实验，细胞确增殖，那就要重新调整浓度，不同实验室的相同细胞耐药性是不一样的
5、确定自己配药过程没有出错，加药浓度没有问题
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

田小荣儿
4楼2017-08-21 16:34:01
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田小荣儿

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-21 16:34:01
1、确定药物作用是增殖还是毒性
2、药物作用及作用时间时间调整细胞密度，一般每孔1000-10000个不等
3、细胞没长满，值又大于1的情况下可以等倍稀释检测，然后数据再X倍数算回来就可以了
4、如果是毒性实验，细胞 ...

回复的很详细。非常感谢

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5楼2017-08-21 19:58:05
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天大电化学

新虫 (初入文坛)
我现在也是这个问题，想请教是如何解决的呀？谢谢

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6楼2018-05-24 17:08:25
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李妞妞呀

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by simple__plan at 2017-08-21 15:11:25
种植的细胞数太大了，吸光度太大了，不能说明问题了？吸光度在 0-0.7之间满足线性关系。另外，药物促进细胞增值？

您好，我最近在做MTT实验，想请教您几个问题，如能回答，不胜感激。1.做MTT实验是不是应该设置空白组？抑制率=【（对照组-空白组）-（实验组-空白组）】/（对照组-空白组）？
2.您说的吸光度0-0.7是对照组的吸光度吧？我之前做的基本上对照组吸光度都大于0.7，这样的结果可信度是不是有点低？
3.我做的悬浮细胞，做MTT实验时，细胞和药物同时混合在一起，放入培养箱中培养，没有贴壁细胞的先加细胞，培养24h后再加药物这一步骤，我是按照文献里的这样操作，但是有人说，得先让细胞适应一段时间再加药，您怎么看？
4.96孔板离心去除上清（前期加的细胞培养基和药物以及MTT） 再加SDS溶解甲赞结晶，可不可以不离心去上清  直接加SDS呢（去上清的时候怕把细胞也吸走）？
5.我看有的视频加了MTT之后往培养箱里放96孔板的时候  用锡箔纸包着，这样有没有必要，或者说这样会不会影响细胞呼吸？
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7楼2019-09-19 11:06:59
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