应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 单链DNA可以做分子克隆吗？
91/1返回列表
查看: 1986  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhoubin0823

木虫 (小有名气)

[求助] 单链DNA可以做分子克隆吗？ 已有2人参与

同事有一段合成的单链DNA，其领导让她克隆到T载体上上，而同事反复问领导单链DNA是否可以克隆到T载体上，领导说可以，然后同事试了发现测序后均没是自连，并没有连上去，我以前也没听说过单链DNA可以克隆到T载体上，请问有大神了解这方面的情况吗？是要进行特殊处理吗？此领导不好仔细去问，所以发帖求助下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2017-08-18 12:35:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落雪6

铁杆木虫 (正式写手)

小兵
连接体系有问题吧？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-08-18 12:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gufeng2008

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
好像可以，以前做过这块，印象中连接酶有缺刻可以自动修复，
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2017-08-18 16:58:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhoubin0823

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gufeng2008 at 2017-08-18 16:58:19
好像可以，以前做过这块，印象中连接酶有缺刻可以自动修复，

感谢回复，还想问一下，连接完后是这一段单链，还是说已经是双链，只是不匹配，需要连接酶来修复？
赞一下 回复此楼
4楼2017-08-18 17:29:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18253592055

金虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-21 11:59:02
我觉得单链的东西怎么可能连到一个双链的东西上，我们之前做单链DNA都是定一个正向一个反向，在一定的条件下形成双链，再进行酶切连接。还有一个问题，你的本身就是单链DNA，一般连t载需要带有A尾，确认一下，希望可以帮到你

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-08-19 12:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18253592055

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhoubin0823 at 2017-08-18 17:29:51
感谢回复，还想问一下，连接完后是这一段单链，还是说已经是双链，只是不匹配，需要连接酶来修复？...

没有原料怎么修复

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-08-19 12:45:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)
连不上去。 连接酶需要双链.
赞一下 回复此楼
7楼2017-08-19 17:05:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pcduak57
8楼2017-08-21 06:41:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

magicbard

铁杆木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
单链用普通的酶切连接是不行的，设计引物PCR可以变成双链再连进去。
如果非要直接连接的话，用NEB的NEBuilder DNA Assembly Cloning Kit可以直接克隆进去，不过比较贵。
赞一下 回复此楼
9楼2017-08-21 08:31:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhoubin0823 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +9 archvillain 2026-08-02 11/550 2026-08-02 15:44 by alexon
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 8/400 2026-08-02 15:01 by jHcrHMhbKCFV
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 14/700 2026-08-02 14:58 by jHcrHMhbKCFV
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 18/900 2026-08-02 14:52 by jHcrHMhbKCFV
[找工作] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 12/600 2026-08-02 13:43 by jHcrHMhbKCFV
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +17 低垂的野花 2026-07-31 23/1150 2026-08-02 13:41 by RRRKKK
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 16/800 2026-08-02 13:34 by jHcrHMhbKCFV
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 14/700 2026-08-02 13:34 by jHcrHMhbKCFV
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +15 布布和一二 2026-07-30 21/1050 2026-08-02 10:56 by iaeyuan
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 10/500 2026-08-02 10:00 by 锦衣卫寒战
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 7/350 2026-08-02 07:59 by 88817753
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +14 wangze12014 2026-07-28 18/900 2026-07-31 18:35 by lzchaihuo
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
[有机交流] 产物和副产物价值比较 30+4 小汤02 2026-07-27 5/250 2026-07-30 12:44 by czyzsu
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 11/550 2026-07-29 05:50 by drbart
[基金申请] 同事接到电话了，我却没有 +4 1234567wang 2026-07-27 4/200 2026-07-28 10:11 by GOODLUCKER
[基金申请] 准备明年的基金了 +5 Tide man 2026-07-27 5/250 2026-07-28 09:25 by newfuzzy1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭