24小时热门版块排行榜    

查看: 661  |  回复: 5

liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 菌株传代染菌 已有1人参与

同时转化两种载体构建大肠杆菌工程菌,转化子正常,但转化子液体培养之后再划线会有两种表型,已验证所加的抗生素没有失效。各位大神是否遇到过相同的情况,请帮忙分析一下问题的原因。
回复此楼
花落人亡两不知
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liuyuxue: 金币+5 2017-08-18 13:46:03
你先确定质粒的ori是不是一样的,如果不一样,是不能同时转化进去的,可能转化子就有问题,如果ori一样的话,建议你最好分开转,筛选的时候也好筛,免得错了都不知道问题在哪?
···
2楼2017-08-18 10:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2017-08-18 10:06:10
你先确定质粒的ori是不是一样的,如果不一样,是不能同时转化进去的,可能转化子就有问题,如果ori一样的话,建议你最好分开转,筛选的时候也好筛,免得错了都不知道问题在哪?

两种质粒ori是一样的,用携带一种质粒的菌株做感受态转化另一种质粒的时候也出现相同问题,筛选平板上就出现两种表型的转化子,就跟染了杂菌一样
花落人亡两不知
3楼2017-08-18 13:48:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuyuxue at 2017-08-18 13:48:53
两种质粒ori是一样的,用携带一种质粒的菌株做感受态转化另一种质粒的时候也出现相同问题,筛选平板上就出现两种表型的转化子,就跟染了杂菌一样...

筛选的时候你应该是加了两种抗生素的呀,你怎么判断有两种表型的?你说的这个表型是菌落结构还是抗性?
···
4楼2017-08-18 18:36:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
5楼2017-08-19 00:53:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
6楼2017-08-19 09:25:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuyuxue 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] FileCode能看出啥? +8 要乐观耀哥 2026-08-10 24/1200 2026-08-13 09:54 by Tide man
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见