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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌株传代染菌
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liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 菌株传代染菌 已有1人参与

同时转化两种载体构建大肠杆菌工程菌，转化子正常，但转化子液体培养之后再划线会有两种表型，已验证所加的抗生素没有失效。各位大神是否遇到过相同的情况，请帮忙分析一下问题的原因。
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花落人亡两不知
1楼 2017-08-17 22:35:16
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liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2017-08-18 10:06:10
你先确定质粒的ori是不是一样的，如果不一样，是不能同时转化进去的，可能转化子就有问题，如果ori一样的话，建议你最好分开转，筛选的时候也好筛，免得错了都不知道问题在哪？

两种质粒ori是一样的，用携带一种质粒的菌株做感受态转化另一种质粒的时候也出现相同问题，筛选平板上就出现两种表型的转化子，就跟染了杂菌一样
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花落人亡两不知
3楼2017-08-18 13:48:53
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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liuyuxue: 金币+5 2017-08-18 13:46:03
你先确定质粒的ori是不是一样的，如果不一样，是不能同时转化进去的，可能转化子就有问题，如果ori一样的话，建议你最好分开转，筛选的时候也好筛，免得错了都不知道问题在哪？
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2楼2017-08-18 10:06:10
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuyuxue at 2017-08-18 13:48:53
两种质粒ori是一样的，用携带一种质粒的菌株做感受态转化另一种质粒的时候也出现相同问题，筛选平板上就出现两种表型的转化子，就跟染了杂菌一样...

筛选的时候你应该是加了两种抗生素的呀，你怎么判断有两种表型的？你说的这个表型是菌落结构还是抗性？
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4楼2017-08-18 18:36:29
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