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发酵液中氮源含量的检测
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实验室现行的方法是紫外分光检测,原理是游离的α-氨基酸与NAC(N-乙酰半胱氨酸)及OPA(邻苯二甲醛)相互作用形成异吲哚,在335nm波长下检测吸光度值来计算α-氨基氮含量。这个方法有3个缺点:1、检测液稳定性较差,OPA容易被空气中的氧气氧化,文献中看到加抗氧化剂β-巯基乙醇改进这点;2、OPA以氨基酸的衍生物稳定性也较差,文献中有加硼酸盐改进这点;3、无法检测无机氮和复杂的有机氮。 考虑到发酵放大,氮源会进行调整,近来在查阅其他的检测方法,看到一些地方说发酵领域有使用甲醛滴定法。我们进行了一点理论的计算和粗略的尝试,发现该方法检测我们的发酵液时误差很大。这两天仔细看了一些相关资料,有几点疑惑向同行请教:1、我们发酵液中α-氨基氮水平较低,大约维持在50~100mg/L,这个方法是否适用;2、关于甲醛滴定有双指示剂和电位指示,两种方法的误差分别会有多大?3、还有什么其他合适的检测方法吗? |
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