应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » CsCl密度梯度离心纯化质粒DNA
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 1298  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Sthunder

木虫 (正式写手)

[求助] CsCl密度梯度离心纯化质粒DNA 已有1人参与

大家好！ 有没有人做过CsCl密度梯度离心纯化质粒DNA的啊？我用 1g/ml的CsCL浓度，13.5 ml quick seal tube, 50TI rotor, 35 000rpm 60 h 离心后发现条带跑到离心管的底部，上面有很小的一条开环，线性DNA条带，而且两带非常靠近。 将下面大的条带（已经在离心管底部）抽出后跑胶发现其中包含质粒DNA（三种形态都有）还有大量的RNA。也就是说各成分并没有完全分离。

如有经验丰富的大神还望多多指教如何才能获取高纯度DNA。 万分感谢！！
回复此楼

» 猜你喜欢
互助互励，共奋共进！！
1楼 2017-08-16 21:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

echo-lee520

木虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-09-04 22:56:48
分子克隆有详细的protocol，1g质粒溶液加1.01gCsCL, 5g质粒原液加100μl 10mg/ml EB, 管底的应该主要是RNA, 一般超螺旋的带是较粗的，在线性或开环的下面，具体分离效果情况依据，总质粒量，离心管管径决定。type 50Ti建议45000r/min 48h
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2017-08-17 09:36:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gqfknd00
3楼2017-08-17 15:09:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyfqc954
4楼2017-08-17 20:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gqfknd00
5楼2017-08-17 21:08:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

echo-lee520

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

分子克隆有详细的protocol，1g质粒溶液加1.01gCsCL, 5g质粒原液加100μl 10mg/ml EB, 管底的应该主要是RNA, 一般超螺旋的带是较粗的，在线性或开环的下面，具体分离效果情况依据，总质粒量，离心管管径决定。type 50Ti建议45000r/min 48h
赞一下 回复此楼
6楼2017-09-04 21:24:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssykl

铁虫 (正式写手)
您好，可否问一下您使用的CsCl是从哪个公司购买的，是什么纯度？需要灭菌吗？我自己也是新手做病毒纯化，什么都搞不清楚！非常谢谢您
赞一下 回复此楼
7楼2018-04-17 11:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Sthunder 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工调剂 +15 kikiki7 2026-03-30 15/750 2026-03-31 04:02 by fmesaito
[考研] 理学07化学 303求调剂 +4 睿08 2026-03-27 4/200 2026-03-30 23:29 by yujianx
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[考研] 11408总分309，一志愿东南大学求调剂，不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 281求调剂 +5 亚克西good 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:42 by dophin1985
[考研] 求收留 +6 1943443204 2026-03-28 6/300 2026-03-30 20:37 by dick_runner
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +10 1428151015 2026-03-27 10/500 2026-03-30 19:00 by 源_2020
[考研] 342求调剂 +4 加油a李zs 2026-03-26 4/200 2026-03-30 16:39 by 晶体之美
[考研] 298求调剂 +3 什么是胖头鱼 2026-03-30 5/250 2026-03-30 14:41 by 青海小西牛
[考研] 324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-26 11/550 2026-03-30 14:27 by JourneyLucky
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭