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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » cDNA检测
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刘鸣祥

铜虫 (初入文坛)

[求助] cDNA检测 已有4人参与

合成cDNA后需要检测其质量，实验室没有直接测定的仪器，且此生物所有序列未知，请问各位大神可以如何确定cDNA的质量是否达到标准？
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1楼 2017-08-15 21:11:53
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-17 07:47:29
没有标准的检测方法吧，能不能直接跑一下电泳看看在哪个区间内
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2楼2017-08-16 09:27:54
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-17 07:47:43
cDNA是由mRNA逆转录而来，可以通过检测mRNA的质量来判断。
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
3楼2017-08-16 17:10:35
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学长阿亮

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-17 07:47:57
你的是什么物种，可以设计actin引物去检测cDNA质量，上网搜一下就好了，如果找不到可以找相近物种的actin
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4楼2017-08-16 20:58:40
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清明河上

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-08-17 07:48:18
设计引物做特定序列PCR扩增，检验扩增条带的质量。但要注意，PCR产物质量不好的话不一定是cDNA不好，也有可能是引物设计或者退火温度不合适，需要调整相关条件。
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5楼2017-08-16 23:07:35
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琳琳blue

新虫 (小有名气)
跑个胶，用в-actin检测一下，看是否出现亮带，亮带大小与亮度怎么样。

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6楼2018-11-18 23:17:38
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