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刘鸣祥

铜虫 (初入文坛)

[求助] cDNA检测 已有4人参与

合成cDNA后需要检测其质量,实验室没有直接测定的仪器,且此生物所有序列未知,请问各位大神可以如何确定cDNA的质量是否达到标准?
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-17 07:47:29
没有标准的检测方法吧,能不能直接跑一下电泳看看在哪个区间内
2楼2017-08-16 09:27:54
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖


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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-17 07:47:43
cDNA是由mRNA逆转录而来,可以通过检测mRNA的质量来判断。
他日扬翼九万里,历大千世界,定我红尘心!
3楼2017-08-16 17:10:35
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学长阿亮

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-17 07:47:57
你的是什么物种,可以设计actin引物去检测cDNA质量,上网搜一下就好了,如果找不到可以找相近物种的actin
4楼2017-08-16 20:58:40
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清明河上

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-08-17 07:48:18
设计引物做特定序列PCR扩增,检验扩增条带的质量。但要注意,PCR产物质量不好的话不一定是cDNA不好,也有可能是引物设计或者退火温度不合适,需要调整相关条件。
5楼2017-08-16 23:07:35
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琳琳blue

新虫 (小有名气)

跑个胶,用в-actin检测一下,看是否出现亮带,亮带大小与亮度怎么样。

发自小木虫Android客户端
6楼2018-11-18 23:17:38
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