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Inwonder.ml

新虫 (小有名气)

[求助] 如何用XAD-4树脂提取根系分泌物的相关操作 已有1人参与

各位虫友:
        大家早上好!本人小白一个,因实验要用XAD-4树脂吸附根系分泌物,然后再用甲醇洗脱出来。但是这块以前没接触过,特来寻求各位大神帮助。
         问题如下:
         1、新购买的XAD-4树脂要如何进行预处理?虽然在文献、百度中看到不少,但是方法各不相同,我该怎么处理?有的说用开水烫,再用乙醇、乙醚等溶剂索氏提取器中各提取24h;有的说是用无水乙醇浸泡,然后冲洗掉乙醇即可
         2、如何用甲醇将树脂中的根系分泌物如何洗脱?这个地方我是一点不懂,是直接用索氏提取器,甲醇作为溶剂提取吗?那么,水浴锅的温度要如何设置
         时间紧急,导师让我尽快做完这个,谢谢各位大神
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哥本哈根达斯

金虫 (知名作家)

先用乙醇浸泡,纯化水洗干净,再用4%的盐酸浸泡,纯化水洗干净,再用氢氧化钠浸泡,纯化水洗干净,洗脱要看你样品的吸附情况,能洗脱就用甲醇,不能就用乙醇或者丙酮,要是分离情况不好还可以用梯度!

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2楼2017-08-11 17:41:16
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哥本哈根达斯

金虫 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Inwonder.ml at 2017-08-12 08:14:29
非常感谢你的回复!已经将树脂放进去6天了,颜色有变浅,但具体吸附情况这个怎么判断?用甲醇洗脱是加入200ml 甲醇震荡还是用索氏提取器提取?请教下步具体做法,万分感谢...

你这个需要装树脂柱,看有没有穿透,然后甲醇之类的自上而下洗脱!

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4楼2017-08-12 08:41:13
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哥本哈根达斯

金虫 (知名作家)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Inwonder.ml at 2017-08-19 17:48:23
你好,我在一篇文献上看到下面的一段话“每3 d 更换1 次营养液, 1 周后将树脂取出, 用200 mL 甲醇将吸附在树脂上的根系分泌物洗脱”,请教这里面的洗脱是怎么做的?用索氏提取器?还是直接用震荡培养箱就可以?抑或 ...

要看你的目的是什么?是要追求收率和纯度,还是只要拿到产物就行?如果你产物热稳定性好,那就用索氏提取器也行,最好是用玻璃树脂柱,把树脂柱装好,先洗杂质,再甲醇或者乙醇洗脱,然后分段收集检测,要是要求不高,随便装瓶子振荡器或者摇床摇一段时间都行。

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10楼2017-08-19 20:49:47
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funding18

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

11楼2017-08-20 21:57:28
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funding18

禁虫 (正式写手)

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13楼2017-08-21 13:47:42
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Inwonder.ml

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-08-11 17:41:16
先用乙醇浸泡,纯化水洗干净,再用4%的盐酸浸泡,纯化水洗干净,再用氢氧化钠浸泡,纯化水洗干净,洗脱要看你样品的吸附情况,能洗脱就用甲醇,不能就用乙醇或者丙酮,要是分离情况不好还可以用梯度!
...

非常感谢你的回复!已经将树脂放进去6天了,颜色有变浅,但具体吸附情况这个怎么判断?用甲醇洗脱是加入200ml 甲醇震荡还是用索氏提取器提取?请教下步具体做法,万分感谢
3楼2017-08-12 08:14:29
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Inwonder.ml

新虫 (小有名气)

我百度上找了些资料,有的说装柱后,往里面加入甲醇这些试剂,要保证柱内液体体积高于树脂柱的体积,,,我这是只加入甲醇,然后等它抽完吗?之后直接旋转蒸发出甲醇就可以了吗?谢谢你

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5楼2017-08-12 23:21:42
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新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-08-12 08:41:13
你这个需要装树脂柱,看有没有穿透,然后甲醇之类的自上而下洗脱!
...

我百度上找了些资料,有的说装柱后,往里面加入甲醇这些试剂,要保证柱内液体体积高于树脂柱的体积,,,我这是只加入甲醇,然后等它抽完吗?之后直接旋转蒸发出甲醇就可以了吗?谢谢你

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6楼2017-08-12 23:23:20
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哥本哈根达斯

金虫 (知名作家)

差不多是这样:树脂装进柱子,先活化,就是加乙醇和酸碱活化,然后纯水洗干净,上料液,上完之后一般还要纯水顶洗一下杂质,再用有机溶剂解析,流速1-2BV,这时候要检测流出来的单位,收集你需要的部分,去旋转蒸发。

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7楼2017-08-13 07:05:05
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Inwonder.ml

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-08-13 07:05:05
差不多是这样:树脂装进柱子,先活化,就是加乙醇和酸碱活化,然后纯水洗干净,上料液,上完之后一般还要纯水顶洗一下杂质,再用有机溶剂解析,流速1-2BV,这时候要检测流出来的单位,收集你需要的部分,去旋转蒸发。 ...

非常感谢你的回复,对我帮助很大!不过我还有点疑问,还望不吝赐教。树脂预处理时已用无水乙醇处理,并用纯水洗净,再装柱后,还得用乙醇、酸价活化吗?还有这流速一定要控制在1~2BV吗?让它自然流完可以不?谢谢
8楼2017-08-13 09:14:23
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新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-08-11 17:41:16
先用乙醇浸泡,纯化水洗干净,再用4%的盐酸浸泡,纯化水洗干净,再用氢氧化钠浸泡,纯化水洗干净,洗脱要看你样品的吸附情况,能洗脱就用甲醇,不能就用乙醇或者丙酮,要是分离情况不好还可以用梯度!
...

你好,我在一篇文献上看到下面的一段话“每3 d 更换1 次营养液, 1 周后将树脂取出, 用200 mL 甲醇将吸附在树脂上的根系分泌物洗脱”,请教这里面的洗脱是怎么做的?用索氏提取器?还是直接用震荡培养箱就可以?抑或是其他方法,,,望请不吝赐教,现在很急,谢谢
9楼2017-08-19 17:48:23
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