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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何用XAD-4树脂提取根系分泌物的相关操作
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Inwonder.ml

新虫 (小有名气)

[求助] 如何用XAD-4树脂提取根系分泌物的相关操作 已有1人参与

各位虫友：
        大家早上好！本人小白一个，因实验要用XAD-4树脂吸附根系分泌物，然后再用甲醇洗脱出来。但是这块以前没接触过，特来寻求各位大神帮助。
         问题如下：
         1、新购买的XAD-4树脂要如何进行预处理？虽然在文献、百度中看到不少，但是方法各不相同，我该怎么处理？有的说用开水烫，再用乙醇、乙醚等溶剂索氏提取器中各提取24h；有的说是用无水乙醇浸泡，然后冲洗掉乙醇即可
         2、如何用甲醇将树脂中的根系分泌物如何洗脱？这个地方我是一点不懂，是直接用索氏提取器，甲醇作为溶剂提取吗？那么，水浴锅的温度要如何设置
         时间紧急，导师让我尽快做完这个，谢谢各位大神
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1楼 2017-08-10 09:39:20
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哥本哈根达斯

木虫 (知名作家)

木虫之王
先用乙醇浸泡，纯化水洗干净，再用4%的盐酸浸泡，纯化水洗干净，再用氢氧化钠浸泡，纯化水洗干净，洗脱要看你样品的吸附情况，能洗脱就用甲醇，不能就用乙醇或者丙酮，要是分离情况不好还可以用梯度！

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2楼2017-08-11 17:41:16
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哥本哈根达斯

木虫 (知名作家)

木虫之王
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3楼: Originally posted by Inwonder.ml at 2017-08-12 08:14:29
非常感谢你的回复！已经将树脂放进去6天了，颜色有变浅，但具体吸附情况这个怎么判断？用甲醇洗脱是加入200ml 甲醇震荡还是用索氏提取器提取？请教下步具体做法，万分感谢...

你这个需要装树脂柱，看有没有穿透，然后甲醇之类的自上而下洗脱！

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4楼2017-08-12 08:41:13
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哥本哈根达斯

木虫 (知名作家)

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9楼: Originally posted by Inwonder.ml at 2017-08-19 17:48:23
你好，我在一篇文献上看到下面的一段话“每3 d 更换1 次营养液, 1 周后将树脂取出, 用200 mL 甲醇将吸附在树脂上的根系分泌物洗脱”，请教这里面的洗脱是怎么做的？用索氏提取器？还是直接用震荡培养箱就可以？抑或 ...

要看你的目的是什么？是要追求收率和纯度，还是只要拿到产物就行？如果你产物热稳定性好，那就用索氏提取器也行，最好是用玻璃树脂柱，把树脂柱装好，先洗杂质，再甲醇或者乙醇洗脱，然后分段收集检测，要是要求不高，随便装瓶子振荡器或者摇床摇一段时间都行。

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10楼2017-08-19 20:49:47
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funding18

禁虫 (正式写手)
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11楼2017-08-20 21:57:28
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funding18

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13楼2017-08-21 13:47:42
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Inwonder.ml

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-08-11 17:41:16
先用乙醇浸泡，纯化水洗干净，再用4%的盐酸浸泡，纯化水洗干净，再用氢氧化钠浸泡，纯化水洗干净，洗脱要看你样品的吸附情况，能洗脱就用甲醇，不能就用乙醇或者丙酮，要是分离情况不好还可以用梯度！
...

非常感谢你的回复！已经将树脂放进去6天了，颜色有变浅，但具体吸附情况这个怎么判断？用甲醇洗脱是加入200ml 甲醇震荡还是用索氏提取器提取？请教下步具体做法，万分感谢
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3楼2017-08-12 08:14:29
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新虫 (小有名气)
我百度上找了些资料，有的说装柱后，往里面加入甲醇这些试剂，要保证柱内液体体积高于树脂柱的体积，，，我这是只加入甲醇，然后等它抽完吗？之后直接旋转蒸发出甲醇就可以了吗？谢谢你

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5楼2017-08-12 23:21:42
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Inwonder.ml

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-08-12 08:41:13
你这个需要装树脂柱，看有没有穿透，然后甲醇之类的自上而下洗脱！
...

我百度上找了些资料，有的说装柱后，往里面加入甲醇这些试剂，要保证柱内液体体积高于树脂柱的体积，，，我这是只加入甲醇，然后等它抽完吗？之后直接旋转蒸发出甲醇就可以了吗？谢谢你

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6楼2017-08-12 23:23:20
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哥本哈根达斯

木虫 (知名作家)

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差不多是这样:树脂装进柱子，先活化，就是加乙醇和酸碱活化，然后纯水洗干净，上料液，上完之后一般还要纯水顶洗一下杂质，再用有机溶剂解析，流速1-2BV，这时候要检测流出来的单位，收集你需要的部分，去旋转蒸发。

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财是底气，色是灵韵，大大方方拥之，不躲不闪方见人生之阔！
7楼2017-08-13 07:05:05
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新虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-08-13 07:05:05
差不多是这样:树脂装进柱子，先活化，就是加乙醇和酸碱活化，然后纯水洗干净，上料液，上完之后一般还要纯水顶洗一下杂质，再用有机溶剂解析，流速1-2BV，这时候要检测流出来的单位，收集你需要的部分，去旋转蒸发。 ...

非常感谢你的回复，对我帮助很大！不过我还有点疑问，还望不吝赐教。树脂预处理时已用无水乙醇处理，并用纯水洗净，再装柱后，还得用乙醇、酸价活化吗？还有这流速一定要控制在1~2BV吗？让它自然流完可以不？谢谢
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8楼2017-08-13 09:14:23
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新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-08-11 17:41:16
先用乙醇浸泡，纯化水洗干净，再用4%的盐酸浸泡，纯化水洗干净，再用氢氧化钠浸泡，纯化水洗干净，洗脱要看你样品的吸附情况，能洗脱就用甲醇，不能就用乙醇或者丙酮，要是分离情况不好还可以用梯度！
...

你好，我在一篇文献上看到下面的一段话“每3 d 更换1 次营养液, 1 周后将树脂取出, 用200 mL 甲醇将吸附在树脂上的根系分泌物洗脱”，请教这里面的洗脱是怎么做的？用索氏提取器？还是直接用震荡培养箱就可以？抑或是其他方法，，，望请不吝赐教，现在很急，谢谢
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9楼2017-08-19 17:48:23
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