应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » cDNA合成
231/3返回列表123下一页
查看: 1413  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

洋小妞baby

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA合成 已有1人参与

第一次发帖。。。
想请教一下关于cDNA合成的问题
在反应管中加入RNA模板和反应液使成20 μl的反应体系，然后进行42℃的孵育，想问一下是待恒温器的温度到42℃然后再放反应管，还是一开始的时候就把反应管放进去，等温度慢慢升到42℃呢？
进行反转录合成后，是等温度降低到0℃再拿开反应管，还是加热完就直接拿开反应管。
多谢各位
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-08-07 20:02:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个其实没那么严格的，我们都是加完样之后直接放PCR 仪里控制温度，进行反应的。

发自小木虫Android客户端
赞一下(2人) 回复此楼
知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
3楼2017-08-07 20:25:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洋小妞baby

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 极北小白熊 at 2017-08-07 20:43:41
反应温度为42度，，既   不低也不高。温度需预设

那我有好几个温度程序呢，感觉其实就想PCR一样，需不需要预设都可以，直接把RNA放进去，然后升温到42℃，逆转录，这样理解对不
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2017-08-08 09:58:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2017-08-07 20:07:48
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

极北小白熊

铁虫 (正式写手)
反应温度为42度，，既   不低也不高。温度需预设

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-08-07 20:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洋小妞baby

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 阿同木 at 2017-08-07 20:07:48
都是恒温放和取吧，我是这样做的。提前调好温度了

那比如说是一系列的温度，先25℃恒温10min，然后42℃15min，然后又85℃呢，我可以直接设置一个程序，等温度恒温到25℃把反应管放进去然后就按照程序走，还是分别等温度恒温到不同温度再放反应管呢
赞一下 回复此楼
5楼2017-08-08 09:51:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

极北小白熊

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 洋小妞baby at 2017-08-08 09:58:48
那我有好几个温度程序呢，感觉其实就想PCR一样，需不需要预设都可以，直接把RNA放进去，然后升温到42℃，逆转录，这样理解对不...

最好不用pcr仪，恒温几十分钟，对pcr仪伤害其实挺大的，如果你们实验室不介意的话，就无所谓了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-08-08 10:02:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洋小妞baby

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 极北小白熊 at 2017-08-08 10:02:31
最好不用pcr仪，恒温几十分钟，对pcr仪伤害其实挺大的，如果你们实验室不介意的话，就无所谓了
...

不用PCR仪,用的是恒温器，完全新手
赞一下 回复此楼
8楼2017-08-08 10:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

极北小白熊

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 洋小妞baby at 2017-08-08 10:30:11
不用PCR仪,用的是恒温器，完全新手...

水浴锅  就行。。反转录要求没有那么高。。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-08-08 11:15:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洋小妞baby

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 极北小白熊 at 2017-08-08 11:15:29
水浴锅  就行。。反转录要求没有那么高。。
...

好滴，谢谢
回复此楼
10楼2017-08-08 15:58:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 洋小妞baby 的主题更新
231/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭