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洋小妞baby

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA合成 已有1人参与

第一次发帖。。。
想请教一下关于cDNA合成的问题
在反应管中加入RNA模板和反应液使成20 μl的反应体系,然后进行42℃的孵育,想问一下是待恒温器的温度到42℃然后再放反应管,还是一开始的时候就把反应管放进去,等温度慢慢升到42℃呢?
进行反转录合成后,是等温度降低到0℃再拿开反应管,还是加热完就直接拿开反应管。
多谢各位
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洋小妞baby

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 阿同木 at 2017-08-07 20:07:48
都是恒温放和取吧,我是这样做的。提前调好温度了

那比如说是一系列的温度,先25℃恒温10min,然后42℃15min,然后又85℃呢,我可以直接设置一个程序,等温度恒温到25℃把反应管放进去然后就按照程序走,还是分别等温度恒温到不同温度再放反应管呢
5楼2017-08-08 09:51:12
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查看全部 23 个回答

匿名

本帖仅楼主可见
2楼2017-08-07 20:07:48
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个其实没那么严格的,我们都是加完样之后直接放PCR 仪里控制温度,进行反应的。

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知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
3楼2017-08-07 20:25:56
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极北小白熊

铁虫 (正式写手)

反应温度为42度,,既   不低也不高。温度需预设

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4楼2017-08-07 20:43:41
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