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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » WB 无条带啊，崩溃
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QQ小虫虫

新虫 (小有名气)

[求助] WB 无条带啊，崩溃 已有3人参与

最近在做wb,抗体是CST 的 转膜后丽春红染色发现条带清晰，但是曝光后只有actin看得出来，目的条带都没有，到底是什么原因呢

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1楼 2017-08-07 14:34:55
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jinkairui123

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是抗体不行吧
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武汉金开瑞生物，提供核酸和蛋白的整体研究方案
2楼2017-08-07 15:07:51
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llsskk112233

新虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-13 08:57:46
丽春红染胶后条带清晰，那是有条带吗？有的话说明你转染不行，自然膜上就没有目的条带了，因为它留在胶体内。

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3楼2017-08-07 15:11:35
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chaosyw

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-13 08:58:18
一抗有可能有问题的，建议到www.labome.com上面查下你自己用的抗体在sci中的引用情况
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4楼2017-08-11 17:19:07
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QQ小虫虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jinkairui123 at 2017-08-07 15:07:51
可能是抗体不行吧

这个都是新买的，都有问题吗？我做的是p-AKT,p-PI3K，FADD,之前用CST做AKT都能跑出来，心累

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5楼2017-08-12 08:50:13
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QQ小虫虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by llsskk112233 at 2017-08-07 15:11:35
丽春红染胶后条带清晰，那是有条带吗？有的话说明你转染不行，自然膜上就没有目的条带了，因为它留在胶体内。

是转膜以后，再用丽春红染的膜，膜上条带清晰

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6楼2017-08-12 08:51:14
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llsskk112233

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by QQ小虫虫 at 2017-08-12 08:51:14
是转膜以后，再用丽春红染的膜，膜上条带清晰
...

那就只能是一抗有问题，你的一抗可能不能跟你的蛋白结合

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7楼2017-08-12 17:37:50
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我心中有猛虎

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该是一抗的问题，因为你actin的能出来的，说明你整个western的步骤是没有问题的啊，所以考虑还是一抗的问题，换另外一个公司吧，国内买抗体就这样，不好使的情况还是比较多的啊
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8楼2017-08-13 12:30:04
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萌面超人123

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by llsskk112233 at 2017-08-06 19:11:35
丽春红染胶后条带清晰，那是有条带吗？有的话说明你转染不行，自然膜上就没有目的条带了，因为它留在胶体内。

丽春红检测的是膜上的蛋白

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9楼2017-09-13 14:22:49
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