目的蛋白将His tag包裹，蛋白不与镍柱结合？急求纯化蛋白的大神指点！ - 分子生物 - 生物化学

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6楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-08-06 23:39:25
（1）超声的功率不对(太大，蛋白炭化，太小，蛋白没有释放) 策略：改变超声功率，并在超声前加入溶菌酶。

（2）样品或者是结合缓冲液不正确：策略：检测pH 及样品和结合缓冲液的组成份（EDTA等）。确保在溶液中 ...

谢谢您，我增加his标签看看，非常感谢！

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11楼2017-08-07 17:37:57

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9楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-07 08:09:59
不好意思，上面说的把蛋白当成原核的来处理了。如果是原核表达，你可以参照一下，如果不是你就变性一下，再复性。实在不行你就重新构建到一个新载体中试试。

好的，谢谢哦

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12楼2017-08-07 17:38:49

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8楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-07 08:01:37
原核表达很多蛋白都会过量表达。蛋白短时间内大量表达而来不及正确折叠，你先把你现有的表达时间缩小一倍看看。如果还不能解决，你只能想办法把把结构打开，再重新折叠。对了，你的蛋白不挂柱，但能溶解吗？有没有 ...

能溶解，没有沉淀的

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13楼2017-08-07 17:39:46

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