24小时热门版块排行榜    

查看: 2407  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

阳光雨露118

新虫 (正式写手)

[求助] 目的蛋白将His tag包裹,蛋白不与镍柱结合?急求纯化蛋白的大神指点! 已有2人参与

如题,载体用peasy-E1,前段带6个His标签,因不挂柱,又在后端加6个His标签,测序正确,能够表达且跑蛋白胶表达量很高,酶活也有,就是过镍住时,结合不上去,目标蛋白在流穿的bunding buffer 中,分析是:His tag被包裹在目的蛋白里,如何解决这个问题???得不到高纯度的蛋白,实验被迫中止,急求过镍柱的高手指点!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

armigera

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 阳光雨露118 at 2017-08-06 23:01:38
您好,可这个蛋白后续实验要求不可变性
...

可以变性纯化,得到蛋白后再复性。用酶活来标记复性蛋白比率。

发自小木虫Android客户端
7楼2017-08-07 06:08:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

水吟秀

铁虫 (初入文坛)

2楼2017-08-06 16:52:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小书生gg

新虫 (小有名气)

一,减少表达时间看看。二,变性,再复性。

发自小木虫Android客户端
3楼2017-08-06 22:40:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阳光雨露118

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 水吟秀 at 2017-08-06 16:52:43
缓冲液是什么?

柠磷缓冲液

发自小木虫Android客户端
4楼2017-08-06 23:00:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见