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泡沫12

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[求助] PBS配置已有1人参与

配了500ml的1×PBS和10×PBS，是把所有试剂称好后，用MiliQ水溶解，测pH，发现前者约为7.5，后者约为7.1，查了一些资料说需要HCL调节到7.4，我这是不是不用调了，这和我用的MiliQ水有关么，谢谢老师

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1楼 2017-08-05 22:34:49

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晋鹏

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【答案】应助回帖

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1. 常规PBS磷酸盐缓冲液

组成成份：

磷酸二氢钾 34 g

1 mol/L氢氧化钠溶液 175 ml

蒸馏水 825 ml

PH 7.2

配制：

先将磷酸盐溶解于500 mL蒸馏水中，用1 mol/L氢氧化钠溶液校正pH后，再用蒸馏水稀释至1000 mL。

稀释液：

取储存液1.25 mL，用蒸馏水稀释至1000 mL。分装每瓶100 mL或每管10 mL，121 ℃高压灭菌15 min。

用途：

主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值，以便让实验的化学反应在最佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工，如食品或者饲料真菌毒素检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。

2. PBS Buffer的配制具体步骤

组份浓度：

137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4

配制量：

1 L

配制方法：

（1）称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

NaCl 8 g

KCl 0.2 g

Na2HPO4 1.42 g

KH2PO4 0.27 g

（2）向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

（3）滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。

（4）高温高压灭菌后，室温保存。

注意：

上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。