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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白质纯化
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白质纯化 已有5人参与

我在做球蛋白纯化时，用凝胶层析，上样前不溶性蛋白应该怎么处理啊？（本人准备考研的学生，向各位大侠请教）

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1楼 2017-08-05 09:11:40
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小书生gg

新虫 (小有名气)
加1-2M的尿素试试看

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2楼2017-08-05 13:14:11
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-05 13:14:11
加1-2M的尿素试试看

不溶啊啊啊，好绝望
蛋白质纯化



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3楼2017-08-06 10:17:54
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水吟秀

铁虫 (初入文坛)
★
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是目的蛋白还是杂质？

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4楼2017-08-06 16:54:01
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小书生gg

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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3楼: Originally posted by Chasing-J at 2017-08-06 10:17:54
不溶啊啊啊，好绝望

...

你确定你这是不溶的蛋白？加了多少浓度的尿素？

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5楼2017-08-06 22:35:43
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 水吟秀 at 2017-08-06 16:54:01
是目的蛋白还是杂质？

目的蛋白，是盐析法粗提到经透析然后冷冻干燥得到的

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6楼2017-08-07 08:30:17
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-06 22:35:43
你确定你这是不溶的蛋白？加了多少浓度的尿素？
...

这是鲎血中提取的，之前也没人做过，所以不太清楚，准备纯化过柱才发现不溶

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7楼2017-08-07 08:33:25
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-06 22:35:43
你确定你这是不溶的蛋白？加了多少浓度的尿素？
...

加的1.2M尿素

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8楼2017-08-07 08:50:23
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小书生gg

新虫 (小有名气)
★
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冻干的你融溶到何种缓冲液里了？

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9楼2017-08-07 14:17:03
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jinkairui123

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的不溶性蛋白”是指包涵体吗？如果是的话用尿素或者盐酸胍进行变性后再上样！
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武汉金开瑞生物，提供核酸和蛋白的整体研究方案
10楼2017-08-07 15:04:29
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