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Chasing-J

新虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白质纯化 已有5人参与

我在做球蛋白纯化时,用凝胶层析,上样前不溶性蛋白应该怎么处理啊?(本人准备考研的学生,向各位大侠请教)

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小书生gg

新虫 (小有名气)

2楼2017-08-05 13:14:11
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-05 13:14:11
加1-2M的尿素试试看

不溶啊啊啊,好绝望
蛋白质纯化



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3楼2017-08-06 10:17:54
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水吟秀

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是目的蛋白还是杂质?

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4楼2017-08-06 16:54:01
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小书生gg

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by Chasing-J at 2017-08-06 10:17:54
不溶啊啊啊,好绝望

...

你确定你这是不溶的蛋白?加了多少浓度的尿素?

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5楼2017-08-06 22:35:43
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 水吟秀 at 2017-08-06 16:54:01
是目的蛋白还是杂质?

目的蛋白,是盐析法粗提到经透析然后冷冻干燥得到的

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6楼2017-08-07 08:30:17
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-06 22:35:43
你确定你这是不溶的蛋白?加了多少浓度的尿素?
...

这是鲎血中提取的,之前也没人做过,所以不太清楚,准备纯化过柱才发现不溶

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7楼2017-08-07 08:33:25
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-06 22:35:43
你确定你这是不溶的蛋白?加了多少浓度的尿素?
...

加的1.2M尿素

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8楼2017-08-07 08:50:23
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小书生gg

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
冻干的你融溶到何种缓冲液里了?

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9楼2017-08-07 14:17:03
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jinkairui123

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的不溶性蛋白”是指包涵体吗?如果是的话用尿素或者盐酸胍进行变性后再上样!
武汉金开瑞生物,提供核酸和蛋白的整体研究方案
10楼2017-08-07 15:04:29
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