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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白质纯化
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-07 14:17:03
冻干的你融溶到何种缓冲液里了？

ph7.4PBS

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11楼2017-08-07 18:23:17
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by jinkairui123 at 2017-08-07 15:04:29
你的不溶性蛋白”是指包涵体吗？如果是的话用尿素或者盐酸胍进行变性后再上样！

如果加了变性剂，纯化完要怎么做活性测定啊？

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12楼2017-08-07 18:32:24
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小书生gg

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
变性完了再复性啊，保证正确的三级结构蛋白才会有活性

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13楼2017-08-07 21:56:37
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hua_geduo

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
尿素或盐酸胍溶解，1-2M不溶，可以提高浓度到6-8M，一般都可以溶了，盐酸胍效果比尿素好一点
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14楼2017-08-08 12:03:47
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Chasing-J

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by hua_geduo at 2017-08-08 12:03:47
尿素或盐酸胍溶解，1-2M不溶，可以提高浓度到6-8M，一般都可以溶了，盐酸胍效果比尿素好一点

那过柱的洗脱液呢

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15楼2017-08-10 17:05:00
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18291126208

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by Chasing-J at 2017-08-06 10:17:54
不溶啊啊啊，好绝望

...

我也有过这情况，直接上8M脲溶解，去上柱子，完了 慢慢梯度透析掉尿素试试。好运哈
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16楼2017-10-11 09:36:58
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