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茗未

新虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳缓冲液。 已有1人参与

琼脂糖凝胶电泳,配胶用的TBE,电泳缓冲液用的TAE和TBE混合液,也可以跑出很好的条带,为什么呢?

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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+5, 鼓励回帖交流 2017-08-04 07:46:46
      TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。  

      TBE的特点是缓冲能力强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收电泳中使用。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-08-03 17:47:52
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