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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助神经元培养染菌解决办法? 已有3人参与

求大师指点:急性分离新生小鼠海马组织,消化获得神经元,进行培养,这个过程中都易感染哪些菌,我之前培养的时候长到第七天都好好的,虽然在20倍显微镜下也能看到一些会动的小黑点,看帖子有前辈叫它黑胶虫,但是并不是很严重。最近一段时间培养的神经元,在前三天的时候都好好的,到第四天整个培养皿里都密密麻麻的都是菌,有得还出现了线状的东西,繁殖也特别快,一天就能长满培养皿,不知道是什么东西

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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+6, 鼓励热心回帖交流 2017-07-31 06:43:46
1、对于黑胶虫的分类,学术界没有明确给予说法。关于黑胶虫的分类,目前大部分人认为黑胶虫污染是微生物感染。在一些文章论述上把黑胶虫归为生物污染类型,但是没把它归为确定的生物分类类型,只是把黑胶虫独立为一种未知生物。而根据中国病毒所和军科院鉴定是一种寄生于牛血清内的一种原虫,似乎和草履虫和变形虫有类似之处,但是由于课题经费不够而不能继续下去,最终也没有有力证明黑胶虫是属于原虫。

2、所谓的”黑胶虫“其实是多种,因为没有明确的定义,所以都把看到的“颗粒”称作”黑胶虫“。
目前已知的有:
(1)硅颗粒,80年代全球都有报道,后经检测其成分99%为硅,怀疑是液体长期存放在玻璃瓶,导致硅颗粒的产生,所以把血清和培养液的瓶子都改为塑料的。
(2)焦虫,寄生在牛的血细胞的寄生虫。
如果是细菌,那就不能称为”黑胶虫“。

3、处理方法:

首先,世界上根本就没有什么黑胶虫,没有人知道黑胶虫的英文名字是什么,没有哪个权威地方能够查到它的来源,没人知道是谁给它命的名。在微生物学上也没听说过有这么一类微生物。那么是谁给它起了个这么一个恐怖的名字呢?答案是一个什么都不懂或者是一个别有用心的人起的名字。

其次,黑胶虫是什么?黑胶虫其实就是一种耐药的细菌!!这在细胞培养中是常遇到的问题,常用的双抗抗菌谱窄,特别是青霉素对一些耐药菌抗菌效力很差,如培养的各种用液被这种耐药菌污染,自然就会在培养液中大量繁殖,这没什么奇怪的。

第三,如何杀灭所谓黑胶虫,根据我的经验换两种抗生素就可以了,用广谱的氨苄或头孢和庆大配合完全可以杀灭这种细菌,在不行就用四环一定可以杀灭的,这是我亲身体验!!听说有的地方还专门卖杀灭黑胶虫的培养基,真是生财有道啊。有些人还说什么国内所有的实验室都被什么黑胶虫污染了,真是别有用心,同志们,当我的细胞被这种菌污染后,我查了很多资料,最后我判断它就是一种细菌,因为它能够被抗生素抑制,我换了抗生素解决了问题,现在我的细胞长得很好。

听说有人把杀灭”黑胶虫“的培养基申请专利了,那我也可以申请了,这可是发明阿,哈哈,可这有什么用呢,为了挣钱,却给国内的科研界带来多大的困惑!

总之,黑胶虫是一种细菌,我们完全可以抑制或杀灭它。

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及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-30 23:02:51
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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-30 23:02:51
1、对于黑胶虫的分类,学术界没有明确给予说法。关于黑胶虫的分类,目前大部分人认为黑胶虫污染是微生物感染。在一些文章论述上把黑胶虫归为生物污染类型,但是没把它归为确定的生物分类类型,只是把黑胶虫独立为一 ...

非常感谢!养细胞的经验之谈很实用呀!另外,还想问前辈有没有见过如图中的线状的东西?是悬浮在培养液中的,我开始以为是死掉的细胞留下的突触,但是可以清楚的看到神经元还长得好好的,这个东西还是会增多,并且速度很快一天就能长满6cm的培养皿
求助神经元培养染菌解决办法?



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3楼2017-07-31 09:55:34
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叶心飞翔

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
自己在细胞培养的过程中也遇到过类似的情况,注意无菌操作和所有试剂都无菌,祝好运!
4楼2017-08-02 09:25:04
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skull123

木虫 (正式写手)

6cm的培养皿,用培养皿本身就容易染细菌吧,为何不用培养瓶?
5楼2017-08-02 11:28:47
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xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

线状的东西如果会不断增多那就是霉菌污染了.
6楼2017-08-04 04:38:26
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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by skull123 at 2017-08-02 11:28:47
6cm的培养皿,用培养皿本身就容易染细菌吧,为何不用培养瓶?

因为后期检测的时候需要在培养皿里检测,神经元又不能进行消化传代

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7楼2017-08-14 09:06:57
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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 叶心飞翔 at 2017-08-02 09:25:04
自己在细胞培养的过程中也遇到过类似的情况,注意无菌操作和所有试剂都无菌,祝好运!

感谢鼓励!试剂试过没问题,器械和手也一直在擦酒精,但总觉得不能做到完全无菌,事实也是每次培养出来的细胞都要染菌,好运快来光顾我吧

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8楼2017-08-14 09:11:18
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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xipha at 2017-08-04 04:38:26
线状的东西如果会不断增多那就是霉菌污染了.

请问前辈知道霉菌的感染源是什么吗?

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9楼2017-08-14 09:13:21
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xipha

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 姣可长点心吧 at 2017-08-14 09:13:21
请问前辈知道霉菌的感染源是什么吗?
...

大多是空气里面飘的孢子. 也有可能老鼠身上就有. 不过你现在需要确定到底是哪里来的污染. 用培养液洗不同的器具养养看. 特别是培养箱,培养液别给污染了.
10楼2017-08-16 07:40:03
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