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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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qd214387

新虫 (初入文坛)

[求助] 用Tris饱和酚提取细菌DNA,加进去饱和酚一下子变红,为啥呢? 已有1人参与

如题,用Tris饱和酚提取细菌DNA,加进去饱和酚一下子变红,之前是淡黄色的我确定没有被氧化。也就是说菌液(已经用溶菌酶和SDS处理过了)氧化性很强,把Tris氧化了?有人可以推测出到底是啥氧化的它么?是核酸,菌内的蛋白还是?菌是肠道厌氧菌!

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810763156

新虫 (小有名气)

请问下  你这样做是破坏细胞壁吗  好让dna裂解出来吗

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6楼2017-08-05 08:06:25
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、红色说明已经氧化了,即使你没打开过的,也可能这样。我们实验室去年就发生过没打开过的酚,变成红色,用这种酚,提核酸效果很差!

2、一般与氯仿混合后要放置过夜后溶液会澄清,这样就可以用了。
关于溶液变色,是因为酚被氧化了。饱和酚里面应该有八羟基奎啉,这样酚就不会被氧化。

3、饱和酚和氯仿混合后混浊,是正常的,但是应该等到澄清了之后才使用。而且为了放置氧化,在取了等量的饱和酚与氯仿混合之后,适当加入一定的饱和酚上层的tris-HCl,起到隔绝空气避免氧化的作用。如果你不等待澄清分层,那么去吸取的溶液就含有部分tris-hcl了。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-30 10:02:14
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qd214387

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-30 10:02:14
1、红色说明已经氧化了,即使你没打开过的,也可能这样。我们实验室去年就发生过没打开过的酚,变成红色,用这种酚,提核酸效果很差!

2、一般与氯仿混合后要放置过夜后溶液会澄清,这样就可以用了。
关于溶液变 ...

不不,您误会了我的意思,Tris饱和酚刚买的,没有变性,也没有被氧化。是加到样本里突然就变红了,是样本的作用。我想问是不是样本里面有什么成分具有强大的氧化特性。

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3楼2017-07-30 10:33:57
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晋鹏

版主 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by qd214387 at 2017-07-30 10:33:57
不不,您误会了我的意思,Tris饱和酚刚买的,没有变性,也没有被氧化。是加到样本里突然就变红了,是样本的作用。我想问是不是样本里面有什么成分具有强大的氧化特性。
...

那肯定的,红色说明已经氧化了。
及时行乐,人生不留遗憾!
4楼2017-07-30 10:48:30
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