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qd214387

新虫 (初入文坛)

[求助] 用Tris饱和酚提取细菌DNA，加进去饱和酚一下子变红，为啥呢？ 已有1人参与

如题，用Tris饱和酚提取细菌DNA，加进去饱和酚一下子变红，之前是淡黄色的我确定没有被氧化。也就是说菌液(已经用溶菌酶和SDS处理过了)氧化性很强，把Tris氧化了？有人可以推测出到底是啥氧化的它么？是核酸，菌内的蛋白还是？菌是肠道厌氧菌！

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1楼 2017-07-30 00:20:26
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、红色说明已经氧化了，即使你没打开过的，也可能这样。我们实验室去年就发生过没打开过的酚，变成红色，用这种酚，提核酸效果很差！

2、一般与氯仿混合后要放置过夜后溶液会澄清，这样就可以用了。
关于溶液变色，是因为酚被氧化了。饱和酚里面应该有八羟基奎啉，这样酚就不会被氧化。

3、饱和酚和氯仿混合后混浊，是正常的，但是应该等到澄清了之后才使用。而且为了放置氧化，在取了等量的饱和酚与氯仿混合之后，适当加入一定的饱和酚上层的tris－HCl，起到隔绝空气避免氧化的作用。如果你不等待澄清分层，那么去吸取的溶液就含有部分tris-hcl了。
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及时行乐，人生不留遗憾！
2楼2017-07-30 10:02:14
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qd214387

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-30 10:02:14
1、红色说明已经氧化了，即使你没打开过的，也可能这样。我们实验室去年就发生过没打开过的酚，变成红色，用这种酚，提核酸效果很差！

2、一般与氯仿混合后要放置过夜后溶液会澄清，这样就可以用了。
关于溶液变 ...

不不，您误会了我的意思，Tris饱和酚刚买的，没有变性，也没有被氧化。是加到样本里突然就变红了，是样本的作用。我想问是不是样本里面有什么成分具有强大的氧化特性。

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3楼2017-07-30 10:33:57
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晋鹏

版主 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qd214387 at 2017-07-30 10:33:57
不不，您误会了我的意思，Tris饱和酚刚买的，没有变性，也没有被氧化。是加到样本里突然就变红了，是样本的作用。我想问是不是样本里面有什么成分具有强大的氧化特性。
...

那肯定的，红色说明已经氧化了。
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及时行乐，人生不留遗憾！
4楼2017-07-30 10:48:30
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qd214387

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-30 10:48:30
那肯定的，红色说明已经氧化了。...

因为我的样本是细菌，我不知道这种细菌样本里的强氧化特性是不是普遍现象，我想尝试找一下到底是啥东西让tris饱和酚变红。

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5楼2017-07-30 10:51:35
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810763156

新虫 (小有名气)
请问下  你这样做是破坏细胞壁吗  好让dna裂解出来吗

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6楼2017-08-05 08:06:25
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