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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR跑胶条带跑不开始怎么回事？
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zjinlong

金虫 (小有名气)

[交流] PCR跑胶条带跑不开始怎么回事？

我在PCR后进行跑胶，结果MAKER跑的很好，而目的条带却堆在上面跑不开，这是怎么回事呢？

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-20 at 12:26 ]
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1楼 2009-02-04 10:37:12
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
我觉得你不是pcr跑不出来，而是pcr没有特异性的产物，主要是模板不纯含蛋白和多糖，是不是点样的时候样品比较粘稠，点样口比较明亮而且靠近点样口有拖带的现象？建议你还是从模板纯化入手。
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会当凌绝顶，一览众山小
4楼2009-02-04 18:39:45
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xiaomuchongfei

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论，欢迎常来生物版~ 2-4 12:32
你的DNA来源是什么？基因组DNA？ 当有蛋白污染的时候DNA跑不出来，因为蛋白的正电荷会与负电的DNA结合，在胶孔中跑不出来，遇到这种问题 应该问问你的导师
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2楼2009-02-04 11:39:46
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hanjun80

金虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论，欢迎常来生物版~ 2-4 12:32
问导师？哈哈，楼上太搞笑了……

1、有可能是楼上说的，有蛋白污染：酚氯仿异戊醇抽提一下即可；
     不过一般PCR产物有那么大量的蛋白污染的可能性不大

2、PCR体系没有问题吗？PCR泳道中，凝胶的底端有带吗？
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我笃信:人定胜天！
3楼2009-02-04 12:03:11
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zjinlong

金虫 (小有名气)
谢谢各位的帮助，我的条带的现象正如三楼所说的，我估计也是模板不纯的原因！
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5楼2009-02-05 08:30:45
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