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zjinlong

金虫 (小有名气)

[交流] PCR跑胶条带跑不开始怎么回事?

我在PCR后进行跑胶,结果MAKER跑的很好,而目的条带却堆在上面跑不开,这是怎么回事呢?

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-20 at 12:26 ]
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xiaomuchongfei


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来生物版~ 2-4 12:32
你的DNA来源是什么?基因组DNA? 当有蛋白污染的时候DNA跑不出来,因为蛋白的正电荷会与负电的DNA结合,在胶孔中跑不出来,遇到这种问题 应该问问你的导师
2楼2009-02-04 11:39:46
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hanjun80

金虫 (正式写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来生物版~ 2-4 12:32
问导师?哈哈,楼上太搞笑了……

1、有可能是楼上说的,有蛋白污染:酚氯仿异戊醇抽提一下即可;
     不过一般PCR产物有那么大量的蛋白污染的可能性不大

2、PCR体系没有问题吗?PCR泳道中,凝胶的底端有带吗?
我笃信:人定胜天!
3楼2009-02-04 12:03:11
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

我觉得你不是pcr跑不出来,而是pcr没有特异性的产物,主要是模板不纯含蛋白和多糖,是不是点样的时候样品比较粘稠,点样口比较明亮而且靠近点样口有拖带的现象?建议你还是从模板纯化入手。
会当凌绝顶,一览众山小
4楼2009-02-04 18:39:45
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zjinlong

金虫 (小有名气)

谢谢各位的帮助,我的条带的现象正如三楼所说的,我估计也是模板不纯的原因!
5楼2009-02-05 08:30:45
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