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yippee_jiang新虫 (小有名气)
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反转录用于qPCR的cDNA模板能否用于普通PCR扩增1-2k的序列? 已有2人参与
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trizol法提了两次总RNA,但是有的基因扩增出来的片段比预测的序列多100+bp,有的基因多300+bp,不知道是预测的不准还是由于基因组DNA污染的问题,所以想用之前制备的qPCR模板试一下,因为这些模板制作的时候都用了去除基因组的试剂盒,但是听说qPCR模板允许扩增的片段较小,不能扩增较长片段序列,请哪位老师解释一下,谢谢! BTW,我用本地BLAST在草鱼基因组中找到的目标序列,也就是我预测的序列,有没有可能是他基因组数据缺失一部分? |
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