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2M盐酸胍对蛋白酶切是否有影响?
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| 最近刚刚开始学习提纯蛋白,蛋白上有sumo-tag,溶解buffer(含有6M盐酸胍)过夜溶解目的蛋白后,过Ni柱洗脱收集目的蛋白,梯度透析后(6M-3M-2M盐酸胍-低盐buffer)收集上清进行酶切sumo-tag,透析至低盐buffer中有沉淀析出,影响了最终蛋白的浓度。而此蛋白在2M盐酸胍中以可溶性状态存在,能否直接在此可溶性状态下进行酶切及后续操作,低摩的盐酸胍对蛋白酶切影响大不大? |
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