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xuping123465

新虫 (小有名气)

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虫号: 3120905
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专业: 细胞生物学

[求助] 买回的高浓度的酶如何分装？一般用什么溶剂？储存温度如何？已有2人参与

我在sigma买了一小瓶黄嘌呤氧化酶。其是悬浮液，共5U。
我每次可能只去0.1个U，那么如此肯定需要分装。
但我没做过酶类，不知道如何分装，边上也没人会这个，所以在这里求助各位，希望有内行人能指导下

十分感谢
下面是网站上酶液的描述：

包装
5, 25 units in serum bottle

物理状态
Suspension in 2.3 M (NH4)2SO4 containing 1 mM sodium salicylate

网页链接是
http://www.sigmaaldrich.com/cata ... h&region=CN

在这里恳请各位指导。

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1楼 2017-07-24 16:59:34

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xuping123465

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

10楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-07-28 09:07:47
不懂，你还想在紫外灯下操作？操作台紫外杀一下菌再做就好，话说你做什么实验，无菌与有菌对你有什么影响...

我的实验就是黄嘌呤氧化酶的抑制实验，部分操作如下：

"总体积3000μl。加缓冲液（共3000-15-40-225=2720μl），加CPD 50μM（取10mM 15μl），加黄嘌呤氧化酶（取2units/ml 40μl），反应混匀后在25°C恒温培养箱中培养15min，再加入底物黄嘌呤（取1mM的225μl），再继续培养5min，测测295nm处的吸收值（OD）。"
我的疑惑是
我买的黄嘌呤氧化酶共2ml，我每次只取个50微升，那么剩下的酶液定要放4°C中进行储存。若我移液枪头未经灭菌，那么一次取液后定会将细菌带入，那存储后是否会滋生更多的细菌，把酶破坏，使酶活丧失？（酶是蛋白质是吧）。不知道我想的是否正确，所以我不知是否要有灭菌，还请您指导。