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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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十月如你

超级版主

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[交流] 柱层析 已有9人参与

柱子出现如图所示情况,请问是什么问题?装柱、分离等过程中有什么操作注意事项?新手操作,之前没有这方面的学习,请大家多多指教,谢谢!

柱层析


柱层析-1


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十月如你

主管区长

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引用回帖:
2楼: Originally posted by lukaus at 2017-07-22 10:30:22
柱子是自己填的吗,会不会是没有填充均匀。还有你加试剂洗脱的时候,是不是倒太快了,把上面的树脂冲散了

柱子是我自己填的,第一次上手,之前没有接触过这方面的的东西。那怎么判断柱子是否填充好了呢?洗脱剂流速一般是多少呢?谢谢你!

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3楼2017-07-22 10:38:23
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RiranX

超级版主

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我猜测的几种可能,供参考:1.填料没压实。2.上样量超载。3.洗脱体系没选择好,导致洗脱速度过快。 4.样品本身所含成分的性质有关。

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6楼2017-07-22 14:03:03
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lukaus

版主

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 十月如你 at 2017-07-22 10:38:23
柱子是我自己填的,第一次上手,之前没有接触过这方面的的东西。那怎么判断柱子是否填充好了呢?洗脱剂流速一般是多少呢?谢谢你!
...

柱层析只在大学实验做过,可能说的有些不恰当。1.填充柱子你要估计一下柱子大概要多少体积的填充物,然后一次性把填充物倒入柱子,可以用笔啊什么的轻轻敲柱身,让中段填充物压实,不至于有大空隙导致填充不均。然后加洗脱剂的时候要慢慢加,不要在柱子内产生气泡2.你要根据需要洗脱的成分的性质选择溶剂,跟楼上说的一样,也有可能是你的溶剂极性没选对,都有洗脱得很快。3.记得我们做实验的时候,加供试品之前填充物上面要留有一厘米多深的洗脱剂,加入供试品之后,可以在上面铺一层薄薄的棉花,然后分两三次慢慢加入你的流动相进行洗脱。可以看看教材或者药典什么的。希望能帮到你。

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9楼2017-07-22 16:27:13
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lukaus

版主

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柱子是自己填的吗,会不会是没有填充均匀。还有你加试剂洗脱的时候,是不是倒太快了,把上面的树脂冲散了

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2楼2017-07-22 10:30:22
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Pharmacy0323

实习版主

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初步判断,柱子里的填料没有压实,再加上上样速度过快,大段的填料上浮,造成样品未完全吸附。

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4楼2017-07-22 12:28:45
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YLeg

超级版主

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柱子没填好,注意加流动相时慢点,均匀点。

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5楼2017-07-22 13:06:26
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only me

版主

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柱子没压实,或者流速太快

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7楼2017-07-22 14:49:54
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476054377

兑换贵宾

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柱子没有装填好吧?用湿法还是干法装柱的?可以 就使用湿法装柱。一般 都是装柱的原因,还有就是混合试剂超声混匀再加;柱子顶端加个棉花或者一层硅胶,再压个玻璃会好些
8楼2017-07-22 16:24:33
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十月如你

专家顾问

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引用回帖:
4楼: Originally posted by Pharmacy0323 at 2017-07-22 12:28:45
初步判断,柱子里的填料没有压实,再加上上样速度过快,大段的填料上浮,造成样品未完全吸附。

请问怎么判断填料有没压实和上浮呢?谢谢你!

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10楼2017-07-22 16:39:11
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