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乔女55

新虫 (著名写手)

[求助] 急求!关于优化培养基 已有1人参与

如题,单因素优化碳源,氮源,金属离子,盐度等培养基成份,以LB培养基作对照,检测酶活,单个优化时几乎每个因素酶活为对照一到两倍,但是优化完后选了最佳因素最佳水平,然后综合起来酶活还是对照组一到两倍,有时甚至更低,是什么原因呢,急求各位!难道是各营养成份互相之间发生化学反应生成了什么影响细菌生长了吗,困扰了好几个月的问题,求助!

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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

理解,有时候一个酶的表达量和活性是受其底物的诱导的,比如纤维素酶,如果在培养基中没有纤维素,该酶的表达和活性就会很低,加入纤维素能诱导蛋白表达上升和提高酶活。你可以试试用你的酶的特异性底物(和其一系列衍生物,有时候衍生物更好因为可以模仿底物又不会被降解)来诱导
7楼2017-07-22 01:09:44
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能是多因素直接产生了互斥作用,另外优化只能提高一到两倍其实也不是很多

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-07-21 00:36:40
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乔女55

新虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-21 00:36:40
有可能是多因素直接产生了互斥作用,另外优化只能提高一到两倍其实也不是很多

是的,所以一直不知道怎么改进,而且数据不稳定影响了我后面的响应面实验,请问你也做过么

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3楼2017-07-21 09:03:18
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我其实不知道你具体想做什么实验,能否稍微把细节说一下,如果只想提高酶活,为什么不能直接选择高表达启动子来表达该基因
4楼2017-07-21 10:20:58
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