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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 急求！关于优化培养基
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乔女55

新虫 (著名写手)

[求助] 急求！关于优化培养基 已有1人参与

如题，单因素优化碳源，氮源，金属离子，盐度等培养基成份，以LB培养基作对照，检测酶活，单个优化时几乎每个因素酶活为对照一到两倍，但是优化完后选了最佳因素最佳水平，然后综合起来酶活还是对照组一到两倍，有时甚至更低，是什么原因呢，急求各位！难道是各营养成份互相之间发生化学反应生成了什么影响细菌生长了吗，困扰了好几个月的问题，求助！

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1楼 2017-07-20 17:03:50
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能是多因素直接产生了互斥作用，另外优化只能提高一到两倍其实也不是很多
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乔女55
2楼2017-07-21 00:36:40
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乔女55

新虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-21 00:36:40
有可能是多因素直接产生了互斥作用，另外优化只能提高一到两倍其实也不是很多

是的，所以一直不知道怎么改进，而且数据不稳定影响了我后面的响应面实验，请问你也做过么

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3楼2017-07-21 09:03:18
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我其实不知道你具体想做什么实验，能否稍微把细节说一下，如果只想提高酶活，为什么不能直接选择高表达启动子来表达该基因
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4楼2017-07-21 10:20:58
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乔女55

新虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-21 10:20:58
我其实不知道你具体想做什么实验，能否稍微把细节说一下，如果只想提高酶活，为什么不能直接选择高表达启动子来表达该基因

因为老师不想做基因工程，所以就优化培养基提高产酶

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5楼2017-07-21 15:19:11
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乔女55

新虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 乔女55 at 2017-07-21 15:19:11
因为老师不想做基因工程，所以就优化培养基提高产酶
...

就是说我这株菌是野生的菌，不做基因工程，只能通过优化培养基成份个培养条件提高产酶量，关键是优化的结果达不到自己的预期。。。

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6楼2017-07-21 15:21:13
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

理解，有时候一个酶的表达量和活性是受其底物的诱导的，比如纤维素酶，如果在培养基中没有纤维素，该酶的表达和活性就会很低，加入纤维素能诱导蛋白表达上升和提高酶活。你可以试试用你的酶的特异性底物（和其一系列衍生物，有时候衍生物更好因为可以模仿底物又不会被降解）来诱导
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7楼2017-07-22 01:09:44
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乔女55

新虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-22 01:09:44
理解，有时候一个酶的表达量和活性是受其底物的诱导的，比如纤维素酶，如果在培养基中没有纤维素，该酶的表达和活性就会很低，加入纤维素能诱导蛋白表达上升和提高酶活。你可以试试用你的酶的特异性底物（和其一系列 ...

确实，但是我的那个酶有老师说不需要诱导的底物，因为他做过，加诱导底物酶活没很大变化，所以他不建议加诱导物

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8楼2017-07-22 09:50:56
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乔女55

新虫 (著名写手)
有没有人啊

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9楼2017-07-23 09:27:34
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乔女55

新虫 (著名写手)
自己顶帖

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10楼2017-07-23 09:27:44
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