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DNA 降解,有颜色。浓度低 已有2人参与
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用CTAB法提取卵菌(类似真菌)的DNA 后,降解严重并且浓度低,还有带颜色。各位大神有什么好招吗? 发自小木虫Android客户端 |
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zhouxfd
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5楼2017-07-22 00:56:32
晋鹏
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【答案】应助回帖
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1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。 2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度; 3、可能是原液浓度太大造成的; 4、可能DNA已降解。 5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer,文献中查的到的。 6、 DNA降解避免核酸酶污染。 7、 DNA上样量过多,可以减少凝胶中DNA上样量。 8、 所用电泳条件不合适,可以将电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应 <15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。 9、 DNA样含盐过高,可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。 10、 有蛋白污染,可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。 11、 DNA变性,电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA |

2楼2017-07-19 21:13:34
zhouxfd
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3楼2017-07-20 08:44:42
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