24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 949  |  回复: 6

Lingabay

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA 降解,有颜色。浓度低 已有2人参与

用CTAB法提取卵菌(类似真菌)的DNA 后,降解严重并且浓度低,还有带颜色。各位大神有什么好招吗?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;
3、可能是原液浓度太大造成的;
4、可能DNA已降解。
5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer,文献中查的到的。
6、 DNA降解避免核酸酶污染。
7、 DNA上样量过多,可以减少凝胶中DNA上样量。
8、 所用电泳条件不合适,可以将电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应   <15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
9、 DNA样含盐过高,可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
10、 有蛋白污染,可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。
11、 DNA变性,电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-19 21:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Lingabay(晋鹏代发): 金币+1, 鼓励回帖交流~ 2017-07-22 21:45:21
用试剂盒提吧,promaga 或 qiagen
3楼2017-07-20 08:44:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lingabay

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-20 08:44:42
用试剂盒提吧,promaga 或 qiagen

试剂盒能解决RNA 污染和颜色问题。但还是不能解决降解问题

发自小木虫Android客户端
4楼2017-07-21 17:52:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxfd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Lingabay at 2017-07-21 17:52:16
试剂盒能解决RNA 污染和颜色问题。但还是不能解决降解问题
...

可以解决,就是因为你用的管子和试剂有RNase
5楼2017-07-22 00:56:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lingabay

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-22 00:56:32
可以解决,就是因为你用的管子和试剂有RNase...

嗯呢,可是降解问题还是不能解决

发自小木虫Android客户端
6楼2017-07-22 10:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huayueyang

新虫 (小有名气)


Lingabay(晋鹏代发): 金币+1, 鼓励回帖交流~ 2017-07-22 21:45:36
研磨加裂解成分时200ul巯基乙醇,研磨时液氮充分

发自小木虫IOS客户端
坚持!
7楼2017-07-22 19:58:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Lingabay 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-14 8/400 2026-04-16 11:30 by maoqinghuijz
[考研] 药学求调剂 +14 喽哈加油 2026-04-14 16/800 2026-04-16 10:15 by beilsong20
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-14 8/400 2026-04-16 10:14 by beilsong20
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 求助调剂,跨调 +19 X十甫寸Y 2026-04-11 20/1000 2026-04-15 21:18 by cuisz
[考研] 0854调剂 +13 长弓傲 2026-04-12 16/800 2026-04-15 13:45 by fenglj492
[考研] 药学305求调剂 +7 玛卡巴卡boom 2026-04-11 7/350 2026-04-15 13:21 by 西北望—风沙
[考研] 调剂求收留 +34 果然有我 2026-04-10 35/1750 2026-04-15 13:05 by 西北望—风沙
[考研] 290求调剂 +21 luoziheng 2026-04-10 23/1150 2026-04-14 15:49 by zs92450
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[考研] 求调剂,985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 14/700 2026-04-13 22:26 by 涵竹刘
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
信息提示
请填处理意见