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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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YYお

新虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳 已有3人参与

跑胶跑了50分钟还没跑好，是由哪些原因引起的。

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1楼 2017-07-19 14:09:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+6, 鼓励热心回帖交流 2017-07-20 07:42:47
影响电泳泳动度的因素：

1、颗粒性质：颗粒的直径、形状及所带静电荷量对泳动速度有较大影响.一般来说颗粒带净电荷量越多,或其形状越接近球形,在电场中的泳动速度就越快.反之则越慢.

2、电场强度：电场强度是指每一厘米的电位降.又称为电位梯度或电势梯度.它对泳动速度起着十分重要的作用.电场强度越高,带电颗粒的泳动速度越快.反之,则越慢.根据电场强度（电压的高低）大小,又可将电泳分为常压电泳（100－500V）和高压电泳（500－10000V）.前者电场强度为2－10伏特/厘米,后者为70－200伏特/厘米.常压电泳多用于分离大分子物质.高压电泳常需要冷却装置.高压电泳时间短,有时仅需数分钟,多用于分离小分子物质.

3、溶液的性质：主要是指电极溶液（缓冲溶液）和蛋白质样品溶液的pH值、离子强度和粘度等.

4、电渗：当支持物不是绝对惰性物质时,常常会有一些离子基团如羧基、磺酸基、羟基等吸附溶液中的正离子,使靠近支持物的溶液相对带电.在电场作用下,此溶液层会向负极移动.反之,若支持物的离子基团吸附溶液中的负离子,则溶液层会向正极移动.这种溶液层的泳动现象称为电渗. 因此,当颗粒的泳动方向与电渗方向一致时,则加快颗粒的泳动速度；当颗粒的泳动方向与电渗方向相反时,则降低颗粒的泳动速度.

5、焦耳热：在电泳过程中,电流强度与释放出热量（Q）之间的关系可列成如下公式： Q＝I2Rt 式中R为电阻；t为电泳时间；I为电流强度.公式表明,电泳过程中释放出的热量与电流强度的平方成正比.当电场强度或电极缓冲液中离子强度增高时,电流强度会随着增大.这不仅降低分辨率,而且在严重时会烧断滤纸或熔化琼脂糖凝胶支持物.

6、筛孔：支持物琼脂和聚丙烯酰胺凝胶都有大小不等的筛孔,在筛孔大的凝胶中溶质颗粒泳动速度快.反之,则泳动速度慢. 除上述影响泳动速度的因子外,温度和仪器装置等因子的影响也应考虑.
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及时行乐，人生不留遗憾！
3楼2017-07-19 21:31:21
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stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-20 07:42:29
如果是单纯的跑得慢，就加大电压，可能是分子量太大的原因。
如果是PCR没条带，建议做阳性对照。阳性对照没有，说明电泳条件和胶有问题。阳性对照正常，样品没有条带，样品处理有问题。
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坚持！
2楼2017-07-19 15:09:35
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普通回帖

YYお

新虫 (初入文坛)
琼脂糖凝胶电泳

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4楼2017-07-19 22:35:36
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YYお

新虫 (初入文坛)
出现第二种带的原因又是什么呢？

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5楼2017-07-19 22:36:29
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zkapan

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2017-07-19 23:43:36
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PattyGao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
问题可以再详细一些吗？或者看看图。对于你放的那张图，你可以blast一下你的引物，可能不是特异性条带
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7楼2017-07-20 20:41:35
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
能看一下你跑的时候的图吗

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你好
8楼2017-07-20 20:58:29
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
有可能电泳漕坏了换一个

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你好
9楼2017-07-20 20:58:49
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
也有可能是tbe问题，跑三次就差不多换了

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你好
10楼2017-07-20 20:59:07
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