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YYお

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[求助] 琼脂糖凝胶电泳已有3人参与

跑胶跑了50分钟还没跑好，是由哪些原因引起的。

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1楼 2017-07-19 14:09:13

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晋鹏

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【答案】应助回帖

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西门吹雪170: 金币+6, 鼓励热心回帖交流 2017-07-20 07:42:47

影响电泳泳动度的因素：

1、颗粒性质：颗粒的直径、形状及所带静电荷量对泳动速度有较大影响.一般来说颗粒带净电荷量越多,或其形状越接近球形,在电场中的泳动速度就越快.反之则越慢.

2、电场强度：电场强度是指每一厘米的电位降.又称为电位梯度或电势梯度.它对泳动速度起着十分重要的作用.电场强度越高,带电颗粒的泳动速度越快.反之,则越慢.根据电场强度（电压的高低）大小,又可将电泳分为常压电泳（100－500V）和高压电泳（500－10000V）.前者电场强度为2－10伏特/厘米,后者为70－200伏特/厘米.常压电泳多用于分离大分子物质.高压电泳常需要冷却装置.高压电泳时间短,有时仅需数分钟,多用于分离小分子物质.

3、溶液的性质：主要是指电极溶液（缓冲溶液）和蛋白质样品溶液的pH值、离子强度和粘度等.

4、电渗：当支持物不是绝对惰性物质时,常常会有一些离子基团如羧基、磺酸基、羟基等吸附溶液中的正离子,使靠近支持物的溶液相对带电.在电场作用下,此溶液层会向负极移动.反之,若支持物的离子基团吸附溶液中的负离子,则溶液层会向正极移动.这种溶液层的泳动现象称为电渗. 因此,当颗粒的泳动方向与电渗方向一致时,则加快颗粒的泳动速度；当颗粒的泳动方向与电渗方向相反时,则降低颗粒的泳动速度.

5、焦耳热：在电泳过程中,电流强度与释放出热量（Q）之间的关系可列成如下公式： Q＝I2Rt 式中R为电阻；t为电泳时间；I为电流强度.公式表明,电泳过程中释放出的热量与电流强度的平方成正比.当电场强度或电极缓冲液中离子强度增高时,电流强度会随着增大.这不仅降低分辨率,而且在严重时会烧断滤纸或熔化琼脂糖凝胶支持物.

6、筛孔：支持物琼脂和聚丙烯酰胺凝胶都有大小不等的筛孔,在筛孔大的凝胶中溶质颗粒泳动速度快.反之,则泳动速度慢. 除上述影响泳动速度的因子外,温度和仪器装置等因子的影响也应考虑.