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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 老师您好，我做DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳条带模糊，很宽。看网上...
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齐齐齐姑娘

新虫 (小有名气)

[求助] 老师您好，我做DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳条带模糊，很宽。看网上... 已有3人参与

老师您好，我做DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳条带模糊，很宽。看网上说的可能是由于盐的浓度过高，用乙醇沉淀除去过多的盐。我想请教的是具体操作是什么。做电泳前我的样是12微升，用PBS缓冲液稀释的DNA样，里面含NaCl, MgCl2。如何用乙醇除去啊，或者老师有没有更好的方法，谢谢了！ @biostar2009

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1楼 2017-07-14 16:16:15
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sweetcoffei

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-16 23:20:05
引用回帖:
4楼: Originally posted by 齐齐齐姑娘 at 2017-07-14 17:30:08
因为必须要用PBS缓冲液稀释，但是盐的浓度又太高，电泳总跑不好。同学们做电泳用的缓冲液是TE，条带很清晰。
...

如果您没有做过DNA提取、纯化，可以这样进行：计算样品NaCl浓度，使其达到0.5M后，加入2倍体积的无水乙醇，-20 C沉淀半小时以上，10000rpm，10min，干燥，水溶解，电泳。希望对你有用！
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7楼2017-07-15 07:52:39
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
结果长啥样？
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2楼2017-07-14 17:16:43
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齐齐齐姑娘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2017-07-14 17:16:43
结果长啥样？
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如图所示，前几个条带跑的一点都不好，谢谢老师
老师您好，我做DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳条带模糊，很宽。看网上...



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3楼2017-07-14 17:28:01
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齐齐齐姑娘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2017-07-14 17:16:43
结果长啥样？
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结果长啥样？

因为必须要用PBS缓冲液稀释，但是盐的浓度又太高，电泳总跑不好。同学们做电泳用的缓冲液是TE，条带很清晰。

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4楼2017-07-14 17:30:08
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