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齐齐齐姑娘

新虫 (小有名气)

[求助] 老师您好，我做DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳条带模糊，很宽。看网上...已有3人参与

老师您好，我做DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳条带模糊，很宽。看网上说的可能是由于盐的浓度过高，用乙醇沉淀除去过多的盐。我想请教的是具体操作是什么。做电泳前我的样是12微升，用PBS缓冲液稀释的DNA样，里面含NaCl, MgCl2。如何用乙醇除去啊，或者老师有没有更好的方法，谢谢了！ @biostar2009

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1楼2017-07-14 16:16:15
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 齐齐齐姑娘 at 2017-07-16 15:37:11
在生工合成的自己设计的DNA链，先加水稀释至10-4次方，做电泳的时候用10mMPBS缓冲液(0.3M NaCl, 5mM MgCl2) 稀释至10-5次方。
...

如果是合成的引物不需要电泳检测吧，直接PCR就行

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10楼2017-07-17 00:15:07
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
结果长啥样？
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2楼2017-07-14 17:16:43
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齐齐齐姑娘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2017-07-14 17:16:43
结果长啥样？
结果长啥样？
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如图所示，前几个条带跑的一点都不好，谢谢老师
老师您好，我做DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳条带模糊，很宽。看网上...



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3楼2017-07-14 17:28:01
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齐齐齐姑娘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2017-07-14 17:16:43
结果长啥样？
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因为必须要用PBS缓冲液稀释，但是盐的浓度又太高，电泳总跑不好。同学们做电泳用的缓冲液是TE，条带很清晰。

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4楼2017-07-14 17:30:08
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