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挑战来了

新虫 (小有名气)

[求助] 老师，你好！我做的是cDNA的PCR反应，用的是同一个模板，... 已有2人参与

老师，你好！我做的是cDNA的PCR反应，用的是同一个模板，同样的反应体系和同样的反应条件。第一次扩不出来，第二次扩又扩出来了，但是扩出来的目的条带亮度比较低，要想扩出亮的目的条带，我应该做出怎样的实验调整呢？请老师给予指导，谢谢！ @biostar2009

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1楼 2017-07-13 12:07:31
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黄何彪

新虫 (初入文坛)
拿pcr产物做模板，再一次进行pcr

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2楼2017-07-13 12:17:37
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HZAU_Tao

新虫 (初入文坛)
循环数高一点，退火温度做个梯度，摸个条件

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3楼2017-07-13 13:39:42
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2017。。。

新虫 (初入文坛)
适当增加变性，退火和延伸的时间

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4楼2017-07-14 05:54:38
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fengshen2005

银虫 (正式写手)
降一点退火温度

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5楼2017-07-14 06:34:26
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PattyGao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做一个梯度分析，看看最适合的温度条件，说明你这个条件并不是最适的
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6楼2017-07-14 09:16:32
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cry_2013

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
保证模板质量，可以试试适当降低下退火温度
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7楼2017-07-15 11:06:58
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