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mochenmi

铜虫 (小有名气)

[求助] pull down筛靶标蛋白已有1人参与

pull down筛靶标的时候,遇到两个问题:
1. 诱饵蛋白和总蛋白的量分别是多少?
2. 诱饵蛋白需要先纯化出来再按一定的量挂回柱子?还是在洗脱前先与总蛋白混合?第一次做不太清楚。

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zhouxfd

木虫 (正式写手)

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感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-02 07:46:18
最好还是做native condition吧,在体内pull down tag好蛋白
2楼2017-07-13 05:30:11
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mochenmi

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-13 05:30:11
最好还是做native condition吧,在体内pull down tag好蛋白

你好,体内pull down的意思是,先在体内表达一个带标签的融合蛋白,提总蛋白后然后直接挂在柱子上?这样蛋白在挂柱前就已经结合好了,对吗?
这样跟免疫沉淀的原理是不是类似?

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3楼2017-08-01 22:06:48
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by mochenmi at 2017-08-01 22:06:48
你好,体内pull down的意思是,先在体内表达一个带标签的融合蛋白,提总蛋白后然后直接挂在柱子上?这样蛋白在挂柱前就已经结合好了,对吗?
这样跟免疫沉淀的原理是不是类似?
...

是的,就是免疫共沉淀
4楼2017-08-02 00:40:00
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