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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » pull down筛靶标蛋白
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mochenmi

铜虫 (小有名气)

[求助] pull down筛靶标蛋白 已有1人参与

pull down筛靶标的时候，遇到两个问题：
1. 诱饵蛋白和总蛋白的量分别是多少？
2. 诱饵蛋白需要先纯化出来再按一定的量挂回柱子？还是在洗脱前先与总蛋白混合？第一次做不太清楚。

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1楼 2017-07-13 04:15:24
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-02 07:46:18
最好还是做native condition吧，在体内pull down tag好蛋白
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2楼2017-07-13 05:30:11
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-13 05:30:11
最好还是做native condition吧，在体内pull down tag好蛋白

你好，体内pull down的意思是，先在体内表达一个带标签的融合蛋白，提总蛋白后然后直接挂在柱子上？这样蛋白在挂柱前就已经结合好了，对吗？
这样跟免疫沉淀的原理是不是类似？

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3楼2017-08-01 22:06:48
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by mochenmi at 2017-08-01 22:06:48
你好，体内pull down的意思是，先在体内表达一个带标签的融合蛋白，提总蛋白后然后直接挂在柱子上？这样蛋白在挂柱前就已经结合好了，对吗？
这样跟免疫沉淀的原理是不是类似？
...

是的，就是免疫共沉淀
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4楼2017-08-02 00:40:00
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