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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 园艺 » 转农杆菌后验证
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3325182

新虫 (初入文坛)

[求助] 转农杆菌后验证 已有2人参与

干扰载体转入农杆菌后如何验证（干扰载体有特殊结构）

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1楼 2017-07-11 16:50:02
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Chiuut

新虫 (初入文坛)
★
3325182(晋鹏代发): 金币+1, 鼓励回帖交流~欢迎常来农林版交流经验~ 2017-09-28 21:29:36
用农杆菌的菌液验证

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3楼2017-07-12 23:58:40
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一叶知秋365

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
3325182(晋鹏代发): 金币+1, 鼓励回帖交流~ 2017-07-28 21:40:59
最初构建载体时怎么验证的，现在就怎么验证呀。

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2楼2017-07-12 09:13:50
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、转化子的PCR鉴定
挑取转化的农杆菌单菌落接种于含50μg/ml Kanamycin的YM液体培养基中，28℃，220rpm摇培16hr，直接用菌液做PCR。

2、转化子的酶切鉴定
提取农杆菌质粒DNA（同大肠杆菌质粒DNA的提取），然后将其转化大肠杆菌，再提取大肠杆菌的质粒DNA进行酶切鉴定。
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及时行乐，人生不留遗憾！
4楼2017-07-13 07:33:24
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