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刘鸣祥

铜虫 (初入文坛)

[求助] 老师您好,我在用ctab法提取植物rna,电泳检测后显示有少... 已有1人参与

老师您好,我在用ctab法提取植物rna,电泳检测后显示有少量DNA污染,请问有什么方法可以在提取过程中将DNA除干净吗? @biostar2009

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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。

2、离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体,如果已经污染DNA了,可以加无RNA酶的DNA酶,37度作用一小时就能去除了。

3、一般按试剂盒操作说明进行即可,如果怀疑有DNA污染,可用DNArase处理,去掉残留DNA。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-11 09:43:21
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-11 09:43:21
1、直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。

2、离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体,如果已经污染DNA了,可 ...

且不谈DNA为何不能溶于NaOH,教唆别人往RNA里加NaOH,并且不说明浓度,也没有后续纠正pH的说明,不知居心何在?
3楼2017-08-07 13:21:14
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